大白菜軟腐病抗性相關(guān)功能基因分子標(biāo)記的開發(fā)及其遺傳定位.pdf

1、大白菜是十字花科蕓薹屬重要植物，是我國及東亞地區(qū)冬春兩季的重要蔬菜。軟腐病是危害大白菜的三大重要病害之一，病原菌主要為胡蘿卜軟腐歐文氏菌胡蘿卜亞種Erwinia．carotovota．subsp．carotovora(簡稱Ecc)。它在田間發(fā)病較重并造成嚴重減產(chǎn)和品質(zhì)下降，是制約大白菜生產(chǎn)的重要因素。在白菜軟腐防御反應(yīng)相關(guān)基因研究基礎(chǔ)上，開展大白菜軟腐病抗性相關(guān)功能基因分子標(biāo)記的開發(fā)和遺傳定位，為分離軟腐病抗性基因及大白菜抗軟腐病分子標(biāo)

2、記輔助育種奠定基礎(chǔ)。 本研究在具有自主產(chǎn)權(quán)的大白菜各種抗病基因、抗逆境基因、防衛(wèi)反應(yīng)基因以及與抗病有關(guān)的各種信號傳導(dǎo)基因和轉(zhuǎn)錄因子基因的ESTs資源基礎(chǔ)上，基于生物信息學(xué)方法，設(shè)計、合成特異性標(biāo)記引物60對，其中56對引物能擴增出清晰條帶，有效引物的比例為93.3﹪。篩選出在一對抗感軟腐病親本間有多態(tài)性的標(biāo)記共計30個，包括EST-PCR標(biāo)記11個，EST-CAPS標(biāo)記19個，且其中有9對引物與內(nèi)切酶的組合不唯一，其中共顯性標(biāo)記

3、16個，顯性標(biāo)記14個，多態(tài)性比例為50﹪。此外，對21條10bp的RAPD隨機引物進行篩選，篩選出在同一抗感親本間表現(xiàn)出明顯多態(tài)性，且?guī)颓逦?、重?fù)性好的RAPD隨機引物共7條，RAPD標(biāo)記11個。在F<,2>群體的142個單株中，對上述41個標(biāo)記位點的基因型進行了統(tǒng)計，有31個標(biāo)記符合3：1或1：2：1的分離比例，頻率為75.6﹪。共有10個標(biāo)記表現(xiàn)偏分離，即不符合孟德爾分離比例(P<0.05)，頻率為24.4﹪。有8個標(biāo)記表現(xiàn)嚴重

4、偏分離(P<0.01)，頻率為19.5﹪。 本試驗以大白菜軟腐病感病品種(A32-2)、抗病品種(A19-2)的F<,1>代自交產(chǎn)生的142個F。單株為作圖群體，利用Mapmaker 3.0軟件對前后篩選出的總計56個多態(tài)性分子標(biāo)記進行遺傳定位，初步構(gòu)建了一張包含47個位點的分子標(biāo)記連鎖圖。其中包括16個EST-CAPS位點，11個EST-SSR位點，10個EST-RCR位點，10個RAPD位點，9個標(biāo)記表現(xiàn)出偏分離。該標(biāo)記遺傳