生物有機肥防控土傳番茄青枯病的效果及其機制研究.pdf

1、番茄青枯病是由青枯菌Ralstonia solanacearum引起的一種毀滅性土傳細菌病害，嚴重制約著番茄產業(yè)的發(fā)展和經濟效益的提高。生物防治因對環(huán)境、生態(tài)和人類健康安全而受到了國內外的關注，并在防治土傳病害中發(fā)揮著越來越重要的作用。利用有益微生物防治青枯病已有大量的報道，但總體還處在生防菌資源收集階段，缺乏穩(wěn)定有效的生防產品。本研究從健康番茄植株根際分離獲得解淀粉芽孢桿菌Bacillusamyloliquefaciens QL-18

2、和皮氏勞爾氏菌Ralstonia pickettii QL-A6，分別研制出抗番茄青枯病的生物有機肥和液體菌劑。通過溫室盆栽和田間試驗研究了生物有機肥和液體菌劑單獨或復合施用控制番茄青枯病的效果，并探討了兩者的作用機理。主要結果如下:
　　 1、調查了南京麒麟鎮(zhèn)后村蔬菜種植區(qū)番茄青枯病的現(xiàn)狀，結果表明:春季發(fā)病率一般低于秋季，前茬為寄主作物的田塊發(fā)病率高于前茬為非寄主作物的田塊。灌溉水源中沒有檢測到致病菌，但在灌溉溝渠中檢測到致

3、病菌。利用選擇性培養(yǎng)基M-SMSA從番茄植株根際分離獲得流動型（疑似致病力青枯菌）和非流動型菌株（疑似無致病力青枯菌），根據形態(tài)特征、生理生化、特異性基因片段擴增、16S rRNA基因序列、致病性鑒定等手段，最終確定流動型菌株為強致病力R.solanacearum（其中一株命名為QL-Rs1115）;非流動型菌株為R.pickettii（其中一株命名為QL-A6）和R.mannitolilytica。
　　 2、從健康番茄植株根

4、際分離到37株對青枯菌QL-Rs1115有抑制能力的細菌，其中B.amyloliquefaciens QL-18對青枯菌的平板抑制作用最強，在健康土壤（水稻土）和帶病土壤（番茄連作土）中均顯著抑制了青枯病發(fā)病率，減少了青枯菌在番茄植株根際和莖基部的數(shù)量。生防菌QL-18具有合成Fengycin、Subtilisin和Iturin等抗生素的能力，在PDA平板上能抑制Rhizoctonia solani，Phytophthora capsi

5、ci，P.nicotianae，F(xiàn)usarium oxysporum f.sp.niveum,F.oxysporum f.sp.cucumuerimu,F.oxysporum f.sp.melonis和Verticillium dahliae Kleb等植物土傳病原真菌。GFP標記研究發(fā)現(xiàn)生防菌QL-18在番茄植株根表具有較好的定殖能力。
　　 3、以菜粕堆肥(RCC)、豬糞堆肥(PMC)、菜粕和豬糞堆肥1∶1混合物（R&P）、

6、雞糞堆肥(CMC)、牛糞堆肥(CDC)和中藥渣堆肥(HRC)和2種泥炭（高位泥炭MP和低位泥炭FP）為原料，篩選適合生防菌QL-18的營養(yǎng)載體。結果表明，RCC不但能為生防菌QL-18提供大量的可溶性C、N養(yǎng)分，使其在載體中更好的繁殖和存活;而且能抑制青枯菌QL-Rs1115的生長，是菌株QL-18的最佳營養(yǎng)載體。在FP中生防菌QL-18也能保持很高的數(shù)量，但與其它堆肥載體相比，F(xiàn)P延長了青枯菌QL-Rs1115的存活時間，因此不是最適

7、的生防菌營養(yǎng)載體。
　　 4、將生防菌QL-18與菜粕堆肥二次固體發(fā)酵制成生物有機肥BOF。盆栽試驗中，在育苗穴盤和移栽盆缽中均施用BOF的處理，番茄植株根際青枯菌的數(shù)量顯著減少，有效降低了青枯病發(fā)病率。田間條件下BOF的控病效果園季節(jié)不同而異，春季施用BOF防效比秋季好，且育苗和移栽時均施用BOF的處理防效高于單施處理。番茄植株青枯病發(fā)病率與土壤中初始青枯菌的含量呈顯著正相關，土壤初始病原菌數(shù)量越高，BOF的防病效果越差。

8、r>　　 5、盆栽試驗研究發(fā)現(xiàn)R.pickettii QL-A6在番茄根際和莖部定殖數(shù)量達到107 cfu/gdw和108 cfu/g fps，具備和青枯菌競爭的能力。灌根法施用R.pickettii QL-A6，能顯著降低根際病原菌數(shù)量，有效防控苗期番茄青枯病的發(fā)生;增加R.pickettii QL-A6的施用量，能顯著提高其生防效率。莖部注射法施用R.pickettii QL-A6的防控效果顯著高于灌根法，R.pickettii

9、QL-A6在地上部各組織大量定殖，抑制了病原菌對番茄的侵染。田間試驗結果表明，莖部注射法施用R.pickettii QL-A6能有效降低番茄青枯病的發(fā)病率。
　　 6、溫室和田間試驗結果表明，育苗施用BOF和莖部注射施用R.pickettii QL-A6兩種方法配施能穩(wěn)定防控番茄青枯病(70％～86％)。田間單獨施用BOF或R.pickettiiQL-A6的防效均受季節(jié)影響:BOF處理的春季防效好(54.7％)，秋季防效差(30