番茄青枯病拮抗菌的篩選及其生防機(jī)制研究.pdf

1、由青枯雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的番茄青枯病化學(xué)防治效果差，生物防治具有巨大的潛力。為此，本研究采用室內(nèi)平板抑菌法，從土壤中篩選得到三株高效拮抗菌JK6、F7和Y-2；采用盆栽試驗(yàn)，研究其對(duì)番茄青枯病的防治效果；采用質(zhì)譜和高效液相色譜方法，鑒定發(fā)酵液粗提物中抗菌活性物質(zhì)；采用熒光定量PCR法，探究拮抗菌施用后土壤中抗菌功能基因數(shù)量的變化。主要結(jié)果如下：
　　（1）拮抗菌JK6、F7和Y-2對(duì)青枯雷

2、爾氏菌的抑菌圈直徑分別高達(dá)34.7、20.3和21.3 mm，且能高效抑制香蕉枯萎病病原菌等多種植物病原菌，其抑菌圈直徑在34.5~45.0 mm之間。通過(guò)生理生化試驗(yàn)和16S rRNA基因序列比對(duì)，菌株JK6初步鑒定為解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens），菌株F7和Y-2為甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌（Bacillus methylotrophicus）。
　?。?）拮抗菌JK6、F7和Y-2顯著降低盆栽

3、番茄青枯病的發(fā)病率，其中JK6的生防效率高達(dá)58.6％，并能顯著促進(jìn)番茄植株的生長(zhǎng)；F7和Y-2的生防效率分別達(dá)46.0%和55.5%。
　?。?）采用C18柱過(guò)濾和甲醇萃取，結(jié)合質(zhì)譜和高效液相色譜方法分析，菌株JK6、F7和Y-2發(fā)酵液中，均檢測(cè)出表面活性素，其含量分別為：64.42、53.09和31.34 mg.L-1。進(jìn)一步驗(yàn)證發(fā)酵液甲醇萃取物對(duì)青枯雷爾氏菌的抑制效果，其抑菌圈直徑分別高達(dá)23、18和19 mm。由此說(shuō)明，表

4、面活性素是該菌株具有生防潛能的直接證據(jù)。
　?。?）各菌株均檢測(cè)到合成脂肽類抗菌物質(zhì)的關(guān)鍵基因srfAB、fenD、ituA、ituC、ituD和yndJ。為此采用熒光定量PCR分析，進(jìn)一步表征拮抗菌JK6、F7和Y-2施用后，土壤細(xì)菌總DNA中功能基因srfAB、fenD、yndJ的拷貝數(shù)顯著高于對(duì)照組。
　　綜合以上，芽孢桿菌JK6、F7和Y-2具有多種抑病原菌功能，可有效防治番茄青枯病，其抗菌活性主要成分是表面活性素。