肉仔雞脾臟和法氏囊基因的表達(dá)特性研究.pdf

1、雞脾臟、法氏囊表達(dá)基因是潛在的與機(jī)體免疫相關(guān)的基因，本研究對(duì)本課題組篩選的17個(gè)脾臟、法氏囊表達(dá)基因（已知基因和未知EST）進(jìn)行其表達(dá)特性研究，研究30％能量限制對(duì)肉仔雞脾臟與法氏囊候選基因表達(dá)的影響，本試驗(yàn)主要從以下兩個(gè)部分進(jìn)行試驗(yàn)研究。
　　試驗(yàn)一
　　為了研究候選基因在不同組織中的表達(dá)情況，以7日齡矮腳絲毛烏骨雞為研究對(duì)象，采用半定量RT-PCR，觀察候選基因在肌胃，腸，腺胃，大腦，肝，胸肌，小腦，腿肌，心，肺，脾臟和

2、法氏囊中的相對(duì)表達(dá)量。
　　試驗(yàn)二
　　本試驗(yàn)選擇體重相近的18日齡健康雌性AA肉仔雞40只，隨機(jī)分成兩組，自由采食組和能量限制組，每組20只。采用個(gè)體單籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)至48日齡，進(jìn)行屠宰，采集脾臟與法氏囊組織，能量限制組和自由采食組各20個(gè)樣本，以單個(gè)個(gè)體為重復(fù)單位。根據(jù)候選基因以及相關(guān)序列設(shè)計(jì)引物，采用熒光定量RT-PCR對(duì)候選基因及相關(guān)序列進(jìn)行定量分析。試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　(1)在脾臟組織中，17個(gè)條帶在能量限制組

3、呈上調(diào)趨勢(shì)的為7條，呈下調(diào)趨勢(shì)的為10條，其中DAD1和ZNF644呈現(xiàn)表達(dá)差異顯著(p＜0.05)，DAD1呈下調(diào)趨勢(shì)，ZNF644呈上調(diào)趨勢(shì)。
　　(2)在法氏囊組織中，17個(gè)條帶在能量限制組呈上調(diào)趨勢(shì)的為5條，呈下調(diào)趨勢(shì)的為12條，其中ACTG表達(dá)差異顯著(p＜0.05)，呈上調(diào)趨勢(shì)。
　　(3)通過對(duì)差異表達(dá)基因功能分析表明:DAD1和ZNF644與疾病相關(guān);ACTG為高度保守基因，存在于大多數(shù)細(xì)胞類型中。