家蠶綿繭突變體差異蛋白組學分析及黃血抑制基因I的精細定位.pdf

1、家蠶吐絲結繭對于自身的生存以及防御天敵都起到了極其重要的作用,同時繭絲能夠為人們所利用,并在絲綢業(yè)、商貿業(yè)、農業(yè)、及文化交流中都發(fā)揮了重要的作用。蠶繭由繭衣、繭層、蛹體及蛻皮四部分構成,繭層可用于生產繅絲,蠶繭的外觀形狀是區(qū)分品種的主要標志之一,一般因種而異。在不斷的進化歷程中,家蠶積累了大量突變體及突變系,其中與蠶繭性狀相關的突變體主要有:綿繭、絲膠繭、外層黃繭、綠繭、薄紙繭等,這些突變體是研究繭質性狀的重要材料。本論文將主要介紹在探

2、索繭絲形成、營繭行為和繭絲著色機理相關基礎信息方面的工作,具體來說包括以下內容:
　　(1)以結繭性狀具有明顯差異的正常繭、綿繭、絲膠繭3個家蠶品系個體為材料,利用雙向電泳圖譜分析技術,對其5齡第3天和第6天幼蟲中部絲腺各區(qū)段的蛋白質樣品分別進行分析,發(fā)現在三個家蠶品系同一時期中部絲腺同一區(qū)段細胞蛋白質中均可檢測到一定數量的特異蛋白斑點。選取一些顯著差異蛋白斑點進行基質輔助激光解析電離飛行時間質譜鑒定分析,得到35個可信蛋白質鑒定

3、結果,利用蛋白質相關數據庫,查詢并分析蛋白相關的功能,這些差異的蛋白質包括參與能量代謝、蛋白質合成等生物學過程的功能蛋白,其中發(fā)現絲氨酸蛋白酶抑制劑16(serpinl6)和絲氨酸蛋白酶抑制劑18(serpinl8)可能與家蠶綿繭突變形成相關,這部分實驗對于家蠶繭絲品質形成機理的研究具有重要參考價值。
　　(2)以中系品種KY(黃血黃繭)基因型為:YY+I+I,和歐系品種Ba(白血白繭),為歐一化,基因型為:+Y+Y II,為材料

4、組配F1代及BC1回交群體,(Ba×KY)×KY和KY×(Ba×KY)分別記作BC1F和BC1M。在本實驗室先前初步定位的基礎上,共篩選出5個SSR標記和1個STS標記共6個多態(tài)性標記與I基因連鎖,利用BC1M群體構建I基因遺傳連鎖圖,連鎖圖的圖距為12.8cM,將I基因定位于S001和STS48-1標記之間,與I基因最近的標記為STS48-1,遺傳距離為0.5cM。最終候選區(qū)域縮小至300kb左右,此區(qū)間有4個預測基因,目前正對其預測