ABA、SA預(yù)處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響.pdf

1、碩士學(xué)位論文論文作者：學(xué)科專業(yè)：指導(dǎo)教師：培養(yǎng)單位：培養(yǎng)類別：完成時間：沈陽師范大學(xué)學(xué)位評定委員會單位代碼：單位代碼：10166ABA、SA預(yù)處理對水分和鹽脅迫下水稻預(yù)處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響甲基化水平的影響陳強(qiáng)生物化學(xué)與分子生物學(xué)李雪梅教授化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院全日制2012年03月01日ABA、SA預(yù)處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響摘要干旱脅迫和鹽脅迫是兩個重要的環(huán)境脅迫因子。由于干旱和鹽脅迫對農(nóng)業(yè)生

2、產(chǎn)造成巨大的危害，嚴(yán)重影響糧食產(chǎn)量，因此二者對植物影響的研究受到了廣泛重視。本文以水稻(yzasativaL.)為試材，研究了在水分脅迫（PEG模擬）下和鹽脅迫（NaCl）下水稻DNA甲基化的變化規(guī)律，揭示水稻對水分、鹽脅迫的響應(yīng)機(jī)制；同時研究了脫落酸、水楊酸預(yù)處理對水分和鹽脅迫下DNA甲基化的影響，實(shí)驗(yàn)預(yù)處理方法為：挑選籽粒飽滿的水稻種子，用1mmolL水楊酸（SA）和0.1mmolL脫落酸（ABA）溶液浸種。主要結(jié)果如下：本文對水稻

3、基因組DNA提取和純化方法進(jìn)行比較，通過CTAB法I和CTAB法II對水稻DNA提取和純化：CTAB法I在提取和純化DNA時，加入適量的RNA酶，除去DNA中殘留的RNA的效果較好，盡可能減少RNA對高效液相體系檢測結(jié)果的影響，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；對高效液相法（HPLC）進(jìn)行DNA總甲基化水平測定的體系進(jìn)行了優(yōu)化，測定水稻葉片DNA甲基化總體水平的最佳色譜條件：流動相為甲醇：磷酸二氫鉀（10mmolL）（10:90，VV），pH3.5左右

4、，流速0.5mlmin，柱溫35℃，C18柱（250mm）是最佳的色譜條件。水分和鹽脅迫下處理組DNA甲基化水平要明顯高于對照組各個時期的總甲基化水平，這說明逆境脅迫會導(dǎo)致DNA總甲基化水平的升高。ABA、SA兩個預(yù)處理組及對照組（未予處理）在受到水分脅迫后，DNA甲基化水平均呈上升趨勢。0h至4h，ABA、SA、CK組上升均較快，SA和CK組在4h到達(dá)了最高值，而ABA預(yù)處理組脅迫后4h接近最高峰值，且CK組明顯高于兩個預(yù)處理組；4h

5、至24h，ABA組達(dá)到最高值，而SA組和CK組則緩慢降低；24h至144h，CK組又呈緩慢升高趨勢，而ABA和SA預(yù)處理組則呈緩慢降低趨勢。由此說明ABA、SA預(yù)處理在一定程度上降低了因水分脅迫而導(dǎo)致DNA甲基化水平的升高。ABA、SA兩個預(yù)處理組及對照組（未予處理）在受到鹽脅迫后，DNA甲基化水平均呈上升趨勢。0h至4h，ABA、SA、CK組均呈明顯增高趨勢且未到達(dá)最高值；4h至24h時ABA和CK組DNA甲基化水平到達(dá)了最高值，而S