我國(guó)香菇主栽品種分子圖譜庫(kù)的構(gòu)建.pdf

1、香菇(Lentinula edodes)是一種重要的食用菌，我國(guó)香菇產(chǎn)量占全世界的70％左右。同時(shí)我國(guó)菌種混亂，同物異名、同名異物現(xiàn)象嚴(yán)重，為了加大食用菌菌種的管理，近些年國(guó)家出臺(tái)了一系列的菌種保護(hù)和菌種真實(shí)性鑒定法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，在鑒定工作中，鑒定任何一個(gè)樣本，需要將全部已有品種做參照樣本才能進(jìn)行，導(dǎo)致新品種的遺傳特異性鑒定工作量越來(lái)越大。
　　 本文以通過(guò)國(guó)家認(rèn)定的25個(gè)香菇品種為材料，應(yīng)用SSR分子標(biāo)記進(jìn)行遺傳學(xué)分析，以探究SS

2、R技術(shù)在香菇品種認(rèn)定中遺傳特異性鑒定的可用性，同時(shí)建立現(xiàn)有主栽香菇品種遺傳特異性分子指紋圖譜，力求為香菇品種認(rèn)定和良種使用奠定分子生物學(xué)基礎(chǔ)，同時(shí)為其他食用菌的認(rèn)定工作提供方法和標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 1.本研究從自行設(shè)計(jì)的36對(duì)引物和來(lái)自于文獻(xiàn)的12對(duì)引物，總共48對(duì)引物中篩選到了14對(duì)具有多態(tài)性的SSR引物，其中自行設(shè)計(jì)的引物10對(duì)，來(lái)自于文獻(xiàn)中的引物4對(duì)。
　　 2.以通過(guò)認(rèn)定的25個(gè)香菇(Lentinula

3、edodes)品種為材料，使用篩選到的14對(duì)引物進(jìn)行SSR分析，引物的多態(tài)性為100％，每對(duì)引物產(chǎn)生的等位基因數(shù)為2-9個(gè)，平均5.0個(gè)，基因型數(shù)為2-12個(gè)，平均6.3個(gè)。
　　 3.選取慶元9015和它的四個(gè)單孢菌株：809(A1B2)、810(A2B1)、811(A2B2)、812(A1B1)作為實(shí)驗(yàn)材料，隨機(jī)選取Paa-1和F7這兩對(duì)引物進(jìn)行SSR分析。最終結(jié)果證明，對(duì)于香菇來(lái)說(shuō)，SSR分子標(biāo)記也是共顯性標(biāo)記，同植物和動(dòng)

4、物以及其他的微生物一樣。
　　 4.對(duì)SSR結(jié)果進(jìn)行遺傳學(xué)參數(shù)分析，表觀雜合度為0.0400-0.9200,平均表觀雜合度為0.4857；預(yù)期雜合度為0.1151-0.8131，平均預(yù)期雜合度為0.6126；PIC值為0.1064-0.7736，平均PIC為0.5541。綜合分析表明除了S4和S15引物的區(qū)分度較差，其他12對(duì)引物區(qū)分度較高，同時(shí)14對(duì)引物綜合使用能表現(xiàn)出很高的區(qū)分度。
　　 5.根據(jù)條帶信息，使用POP

5、GENE ver.1.32軟件計(jì)算25個(gè)香菇供試菌株之間的遺傳距離，結(jié)果表明，申香10號(hào)和申香12號(hào)之間的遺傳距離最小，為0.0000；香九和L9319之間的遺傳距離最大，為2.3885；25個(gè)供試菌株之間的平均遺傳距離為0.6407。
　　 25個(gè)品種中，除申香10號(hào)和申香12號(hào)不能區(qū)分外，對(duì)其他23個(gè)品種清晰鑒別。最終利用14對(duì)引物的擴(kuò)增圖譜構(gòu)建了我國(guó)香菇已通過(guò)認(rèn)定的栽培菌株的指紋圖譜，本圖譜可以成為重復(fù)性良好、試驗(yàn)室間可比