聯(lián)苯菊酯和滴滴涕對大鼠卵巢功能干擾研究.pdf

1、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是仿效天然除蟲菊酯化學(xué)結(jié)構(gòu)的合成酯類,是繼有機(jī)氯、有機(jī)磷和氨基甲酸酯之后出現(xiàn)的具有高效低毒的新型殺蟲劑,被廣泛地應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和家庭害蟲防治。有機(jī)氯農(nóng)藥滴滴涕雖然已被世界上大多數(shù)國家禁用幾十年,但由于其具有難降解、易遷移、易生物富集等特點(diǎn),因此在環(huán)境介質(zhì)中常被檢出。由于擬除蟲菊酯的普遍、廣泛和高頻使用以及DDT的高檢出率,因此人類和其它哺乳動物在環(huán)境中長期接觸擬除蟲菊酯和DDT的可能性很大。近年來,擬除蟲菊酯和DDT對女性生

2、殖健康引起了廣泛的關(guān)注,但是其對女性生殖毒性機(jī)制報(bào)道尚少。在本研究中,我們分別選取聯(lián)苯菊酯(BF)和o,p'-DDT為對象,以體外培養(yǎng)的大鼠卵巢顆粒細(xì)胞為研究模型,探討它們對大鼠卵巢功能的影響,為女性生殖健康風(fēng)險(xiǎn)評估提供一定的科學(xué)依據(jù)。
　　 BF是典型的Ⅰ型擬除蟲菊酯之一,以前的研究表明BF具有對映選擇性,細(xì)胞毒性,免疫毒性和內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)我們分別從外消旋和對映體層面上探究BF對大鼠卵巢功能的干擾機(jī)制。外消旋結(jié)果表明:

3、體外和體內(nèi)暴露BF顯著抑制了促黃體激素(LH)誘導(dǎo)的排卵大鼠卵巢顆粒細(xì)胞基因的表達(dá)。由于前列腺素E2(PGE2)及其關(guān)鍵合成酶PTGS2在排卵過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,因此我們進(jìn)一步調(diào)查外消旋BF抑制PTGS2表達(dá)的分子機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn),BF減少了LH誘導(dǎo)的顆粒細(xì)胞培養(yǎng)液中PGE2的分泌量,降低了forskolin刺激的PTGS2的表達(dá)和PTGS2啟動子的轉(zhuǎn)錄活性,表明外消旋BF可能通過影響PTGS2轉(zhuǎn)錄活性來抑制LH誘導(dǎo)的PTGS2表達(dá)。對映

4、體的結(jié)果表明:與1R-cisr-BF相比,1S-cis-BF顯著性地抑制了LH誘導(dǎo)的卵巢基因的表達(dá),降低了顆粒細(xì)胞LH誘導(dǎo)的孕酮和前列腺素E2分泌量。我們進(jìn)一步探討其干擾這些激素的合成的對映選擇性分子機(jī)制,發(fā)現(xiàn)BF可能通過對映選擇性抑制StAR和COX-2轉(zhuǎn)錄活性以及蛋白激酶C(PKC)活性來干擾這些激素的合成,具體表現(xiàn)為1S-cis-BF的干擾作用強(qiáng)于1R-cis-BF。本研究首次發(fā)現(xiàn)BF對卵巢基因表達(dá)網(wǎng)絡(luò)以及激素的合成造成干擾,且這

5、種干擾具有對映體選擇性。綜上所述,擬除蟲菊酯的暴露可能會增加女性排卵功能障礙的風(fēng)險(xiǎn),且有必要整體評估手性擬除蟲菊酯的潛在健康影響,為手性農(nóng)藥的環(huán)境安全和健康風(fēng)險(xiǎn)評價提供科學(xué)依據(jù)。
　　 DDT在許多國家已被禁用,但仍然存在較高的檢出率。環(huán)境低濃度DDT的暴露對女性生殖健康的影響引起了廣泛關(guān)注。本研究以大鼠卵巢顆粒細(xì)胞為研究模型研究低濃度暴露o,p'-DDT對大鼠卵巢功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):體外暴露o,p'-DDT(10-11～10

6、-9M)顯著抑制LH誘導(dǎo)的圍排卵大鼠卵巢顆粒細(xì)胞基因的表達(dá);利用ICI182,780阻斷ER經(jīng)典途徑,發(fā)現(xiàn)它并沒有阻斷o,p'-DDT對LH誘導(dǎo)的基因表達(dá)的抑制,說明o,p'-DDT可能通過ER非依賴途徑抑制這些基因的表達(dá);蛋白激酶A(PKA)活性結(jié)果進(jìn)一步表明o,p'-DDT可能通過PKA信號通路抑制這些基因的表達(dá)。本項(xiàng)目著重考察低濃度o,p'-DDT的暴露對排卵相關(guān)基因表達(dá)的影響及其機(jī)制,對于準(zhǔn)確評價此類環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的健康風(fēng)險(xiǎn)具