米非司酮對(duì)大鼠卵巢功能的影響.pdf

1、目的：米非司酮可延遲、抑制卵泡發(fā)育和排卵，停藥后卵泡發(fā)育及排卵在短時(shí)間內(nèi)得到恢復(fù)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)給予大鼠不同劑量米非司酮灌胃，初步探討不同劑量米非司酮對(duì)大鼠卵巢卵泡發(fā)育、雌激素分泌的影響，特別是對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能的影響，為臨床安全用藥提供理論依據(jù)。 方法：選用體重230±20g雌性未孕Sprague-Dawley(SD)大鼠40只，每日取陰道細(xì)胞學(xué)，巴氏染色，有連續(xù)兩個(gè)規(guī)律動(dòng)情周期者納入研究，隨機(jī)分為米非司酮低劑量組、米非司酮中劑量組、

2、米非司酮高劑量組及空白對(duì)照組共四組，于動(dòng)情間期早期(相當(dāng)于早卵泡期)開(kāi)始分別予米非司酮1.04(mg/kg/d)、2.604(mg/kg/d)、10.4(mg/kg/d)及生理鹽水灌胃，連續(xù)四周。用藥結(jié)束后于動(dòng)情間期處死每組動(dòng)物各5只，剩余大鼠停藥后每同取陰道細(xì)胞學(xué)，在停藥后第三個(gè)動(dòng)情間期早期(相當(dāng)于早卵泡期)處死。所有大鼠卵巢常規(guī)石蠟包埋、HE染色，顯微鏡觀察卵巢組織形念學(xué)改變，并采用體視學(xué)計(jì)數(shù)始基卵泡和初級(jí)卵泡卵泡數(shù)目：化學(xué)發(fā)光法檢

3、測(cè)血清雌二醇(E<,2>)水平變化；用藥4周結(jié)束時(shí)，采用免疫組化檢測(cè)caspase-3在生長(zhǎng)卵泡中的表達(dá)變化及半定量分析。 結(jié)果： 1．卵巢形態(tài)學(xué)觀察：停藥后對(duì)照組可見(jiàn)大量生長(zhǎng)卵泡，實(shí)驗(yàn)組各級(jí)生長(zhǎng)卵泡減少，閉鎖卵泡增多：停藥后第三個(gè)動(dòng)情周期，各組均可見(jiàn)大量生長(zhǎng)卵泡，閉鎖卵泡較少；所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均可見(jiàn)大量始基卵泡及初級(jí)卵泡，分布于卵巢皮質(zhì)下。 2．體視學(xué)分析：停藥后，對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組始基卵泡和初級(jí)卵泡數(shù)目組間無(wú)差異(

4、P>0.05)；停藥后第三個(gè)動(dòng)情周期，對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組始基卵泡和初級(jí)卵泡數(shù)目組間無(wú)差異(P>0.05)。 3．血清雌二醇水平變化：停藥后各實(shí)驗(yàn)組血清E<,2>水平較對(duì)照組下降，隨用藥劑量的增加呈下降趨勢(shì)，對(duì)照組與低劑量組、中劑量組組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，中劑量組與低劑量組、高劑量組組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，高劑量組與對(duì)照組、低劑量組有差異(P<0.05)；停藥后第三個(gè)動(dòng)情周期，低劑量組血清E<,2>水平

5、較前升高不明顯，中劑量組及高劑量組血清E<,2>水平較前升高，各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組E<,2>水平組間無(wú)差異(P>0.05)。 4．caspase-3免疫組化：各級(jí)生長(zhǎng)卵泡顆粒細(xì)胞中活化caspase-3蛋白表達(dá)，正常對(duì)照組顆粒細(xì)胞胞漿呈淺棕黃色、低劑量組、中劑量組顆粒細(xì)胞胞漿呈棕黃色表達(dá)，高劑量組絕大多數(shù)顆粒細(xì)胞胞漿呈棕黃至棕褐色表達(dá)，部分出現(xiàn)胞核陽(yáng)性表達(dá)。隨著用藥劑量增加，蛋白表達(dá)增強(qiáng)，各組IOD值呈上升趨勢(shì)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、(P<0.05)。 結(jié)論： 1．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明用不同劑量米非司酮四周可抑制卵泡生長(zhǎng)、不同程度降低血清E<,2>水平，隨著藥物劑量的增加對(duì)卵巢抑制作用增強(qiáng)，停藥后第三個(gè)動(dòng)情周期，卵泡生長(zhǎng)發(fā)育及血清E<,2>水平可得以恢復(fù)，不同劑量米非司酮不引起始基卵泡和初級(jí)卵泡數(shù)目減少。 提示米非司酮可能作用于生長(zhǎng)卵泡，抑制卵泡發(fā)育、引起卵泡閉鎖，而對(duì)始基卵泡及初級(jí)卵泡影響較小，表明對(duì)卵巢儲(chǔ)備功能沒(méi)有影響，臨床用藥安全；隨著米非司酮