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文檔簡介
1、以甘藍(lán)的19種基因型為材料,進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。研究甘藍(lán)基因型及其影響因素對小孢子誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響,同時(shí)以EWlO、EF27、EFl4、秦甘70、秦甘80等為材料,研究花蕾長度、低溫處理、高溫處理、AgN03、活性炭、激素以及pH值等對甘藍(lán)小孢子誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響。主要結(jié)果如下: 1.基因型是影響甘藍(lán)小孢子誘導(dǎo)培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素。不同甘藍(lán)基因型小孢子培養(yǎng)的誘導(dǎo)率差異顯著。19個(gè)供試材料中有16個(gè)基因型能誘導(dǎo)胚狀體,其中EWl0、EF2
2、7、EW09、秦甘70、秦甘80等5個(gè)材料胚狀體誘導(dǎo)頻率較高;有3個(gè)材料無法獲得胚狀體。 2.花蕾大小對小孢子培養(yǎng)的效果有很大的影響。通過花蕾長度進(jìn)行鏡檢,發(fā)現(xiàn)3.1~4.5mm的花蕾長度的小孢子70%以上都處于單核靠邊期和雙核早期,表明3.1~4.5mm長度花蕾是誘導(dǎo)胚狀體產(chǎn)生的最佳時(shí)期。 3.低溫預(yù)處理和適當(dāng)?shù)母邷靥幚硎切℃咦优囵B(yǎng)中提高胚狀體誘導(dǎo)頻率的重要因素。低溫預(yù)處理對小孢子胚產(chǎn)量有顯著影響,不同基因型所需預(yù)處理
3、時(shí)間不同。供試材料經(jīng)低溫預(yù)處理,小孢子胚產(chǎn)量均有明顯提高。在小孢子培養(yǎng)前對花蕾進(jìn)行0~4℃48h的低溫預(yù)處理,并且培養(yǎng)初期給予小孢子33℃24h的高溫暗培養(yǎng),可以獲得較好的誘導(dǎo)效果。 4.培養(yǎng)基中添加AgN03對甘藍(lán)小孢子胚狀體的誘導(dǎo)沒有促進(jìn)作用,添加AgN03的處理比不添加.AgN03處理的誘導(dǎo)率略低。培養(yǎng)基中添加活性炭對甘藍(lán)小孢子胚狀體的誘導(dǎo)有明顯影響,在附加活性炭的培養(yǎng)基上,各基因型胚產(chǎn)量所占比率在總體上有大幅度的提高。
4、 5.激素在小孢子誘導(dǎo)培養(yǎng)中具有重要的影響作用,但不同基因型對激素的反映不同。通過對供試材料在NLN-13液體培養(yǎng)基中添加激素6-BA與NAA 5種濃度比例,進(jìn)行甘藍(lán)小孢子誘導(dǎo)胚狀體培養(yǎng)。秦甘70以無激素培養(yǎng)出胚率最高,為3.00胚/蕾;秦甘80以單一加入6-BA0.05mg/L激素出胚率最高,為3.75胚/蕾; EFl4以6-BA0.05mg/1+NAA0.5mg/L激素組合效果較好,其出胚率為2.25胚/蕾;晚豐以6-BA0.
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