微衛(wèi)星標記在牙鲆(Paralichthys olivaceus)增殖放流中的應(yīng)用研究.pdf

1、牙鲆(Paralichthys olivaceus)是我國重要的海洋經(jīng)濟魚類之一,它不僅是我國重要的捕撈對象,也是主要的海水增養(yǎng)殖魚類。近年來,由于沿海污染嚴重,加之捕撈過度,牙鲆自然資源急劇下降。人們通過人工放流來增加群體數(shù)量,但是對其增殖效果卻一直未能精確評估。作為解決這一問題的關(guān)鍵之一,即區(qū)分放流牙鲆和野生牙鲆的技術(shù)尚有待建立。
　　本研究分兩部分,一是利用多態(tài)性微衛(wèi)星標記對養(yǎng)殖牙鲆進行了親子鑒定,分析鑒定準確率與微衛(wèi)星標記

2、之間的關(guān)系,并在此基礎(chǔ)上比較不同親本對子代貢獻率的差異。二是以牙鲆親魚和回捕牙鲆為研究對象,采用親子鑒定的方法,從回捕牙鲆中區(qū)分出放流牙鲆和野生牙鲆,并對三者的遺傳多樣性進行比較分析。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　(1)利用18對高度多態(tài)性微衛(wèi)星標記,對13尾(5♀,8♂)牙鲆(Paralichthys olivaceus)親魚的188尾后代進行親子鑒定,計算其非親排除率、鑒定準確率以及親本對子代的貢獻率。18個標記的平均非親排除

3、率為0.783,其中POLI-003-HFS最高,為0.916,Newpao202和Poli1617最低,為0.604。結(jié)果表明,使用4個微衛(wèi)星標記進行親子鑒定,累積排除率≥0.9999,準確率為92.02％;用6個標記的累積排除率≥0.999999,準確率為96.81%;用8個標記的累積排除率≥0.999999999,準確率為97.87%;用10個標記的準確率為99.47%;用12～18個標記的準確率為100%。親緣關(guān)系會影響親子鑒定

4、的準確率,親子鑒定準確率隨非親排除率和微衛(wèi)星標記數(shù)目的增多而升高。所有子代全部是實驗親本的后代,即13個親本對子代均有貢獻,但不同親本的貢獻率不同,最高為47.34%,最低為0.53%。
　　(2)從經(jīng)過實驗驗證的18個微衛(wèi)星標記中挑選出8個微衛(wèi)星標記對321尾回捕牙鲆進行親緣關(guān)系鑒定,結(jié)果為91尾是放流牙鲆,其余230尾是非放流牙鲆,放流牙鲆占回捕魚的28.35%,非放流牙鲆占71.65%。對親本群體、放流群體和野生群體進行了遺

5、傳多樣性分析:3個群體在8個多態(tài)性位點共檢測到103個等位基因,每個位點平均等位基因數(shù)為12.88,顯示出較為豐富的基因庫。3個群體的平均觀測雜合度分別為0.8115、0.7756和0.7827,平均期望雜合度分別0.8257、0.7858和0.8154,平均觀測雜合度均小于平均期望雜合度,表明3個群體存在一定程度上的雜合子缺失現(xiàn)象。3個群體的平均多態(tài)信息含量依次為0.7998、0.7550和0.7932,平均Shannon's指數(shù)分別

6、為2.0076、1.8499和2.0028,表現(xiàn)出較高的遺傳多樣性。3個牙鲆群體都具有較高的遺傳多樣性,雖然放流群體比另外兩者較低,但這種差異并不顯著(P>0.05),表明放流群體并未對野生種群的遺傳多樣性產(chǎn)生影響。Hardy-Weinberg的χ2檢驗發(fā)現(xiàn),在所檢測的24個數(shù)據(jù)中(8個位點,3個群體),有19個偏離平衡狀態(tài)。3個群體中,親本群體和放流群體相似系數(shù)最高(0.9693),它們首先聚為一支,然后再和野生群體聚為一類。