自然休眠期油桃花芽碳水化合物變化規(guī)律及相關(guān)基因的表達(dá)分析.pdf

1、本研究以十年生露天和三年生盆栽‘曙光'油桃（Prunus persica var.Nectarine cv.Shuguang.）花芽為試材，主要研究了桃樹(shù)花芽RNA提取、碳水化合物代謝及其相關(guān)基因的季節(jié)性表達(dá)及低溫處理下相關(guān)基因的表達(dá)變化；利用抑制差減雜交技術(shù)（SSH），以休眠期花芽RNA為Tester，以休眠解除期花芽RNA為Driver，構(gòu)建花芽休眠相關(guān)基因的差減cDNA文庫(kù)。主要結(jié)論如下：
　　 1、經(jīng)改良CTAB法提取的

2、油桃花芽RNA，電泳檢測(cè)條帶清晰,28S與18S亮度比約為2:1，說(shuō)明RNA完整性較好；核酸分光光度計(jì)檢測(cè)A260/A280為2.0左右，說(shuō)明無(wú)蛋白等雜質(zhì)殘留，能滿足基因表達(dá)分析等后續(xù)試驗(yàn)的要求；而Trizol試劑盒法所提取的RNA，幾乎檢測(cè)不到條帶，難以達(dá)到進(jìn)一步試驗(yàn)的要求。
　　 2、休眠期間可溶性糖（主要是蔗糖）含量尤其是在內(nèi)休眠后期顯著增加，淀粉含量則呈相反趨勢(shì)，在內(nèi)休眠后期含量降低，預(yù)示著內(nèi)休眠的結(jié)束；葡萄糖和果糖含量

3、稍有降低，變化不大；糖代謝相關(guān)基因AGPase、HisH3、HK1、SuSy、UGPase表達(dá)明顯不同：AGPase無(wú)明顯變化；HisH3和HK1在進(jìn)入內(nèi)休眠前有明顯上升，SuSy則與之相反；UGPase含量總體上呈上調(diào)趨勢(shì)，只是在進(jìn)入內(nèi)休眠后稍有下調(diào)。表明進(jìn)入內(nèi)休眠后，依賴HK1的糖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑起重要作用，UGPase在促進(jìn)蔗糖合成上起著重要作用；4 ℃低溫處理后發(fā)現(xiàn)：與細(xì)胞分裂有關(guān)的基因HisH3含量急劇升高，而后下降，說(shuō)明細(xì)胞分裂