加味白頭翁湯對(duì)肉仔雞大腸桿菌病的防治效果研究.pdf

1、肉雞大腸桿菌病是臨床上常見(jiàn)的禽病之一，具有發(fā)病快、死亡率高的特點(diǎn)，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)造成了極大的危害。隨著肉雞養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展和集約化程度的提高，肉仔雞大腸桿菌流行勢(shì)頭愈加猛烈，給肉雞生產(chǎn)造成了嚴(yán)重?fù)p失。長(zhǎng)期以來(lái)，對(duì)于大腸桿菌病多采用抗生素等藥物進(jìn)行防治，由于抗生素等化學(xué)藥物的不合理應(yīng)用，導(dǎo)致大腸桿菌的耐藥譜不斷擴(kuò)大，且易在禽體內(nèi)形成殘留，嚴(yán)重影響了人類健康和公共衛(wèi)生安全。中草藥及中藥組方制劑對(duì)禽大腸桿菌病有較好的防治效果，并具有殘留低、治愈

2、率高、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，符合當(dāng)今社會(huì)倡導(dǎo)的綠色養(yǎng)殖的行業(yè)要求，有著廣闊的應(yīng)用前景。雖然中藥防治肉雞大腸桿菌病的研究很多，但還存在著許多制約其推廣應(yīng)用的難點(diǎn)。本研究目的是篩選出防治雞大腸桿菌病的最佳中藥組方，并對(duì)其臨床療效及其機(jī)理作初步的探討，為其進(jìn)一步應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐提供理論依據(jù)。
　　1.中藥組方篩選
　　根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論自擬中藥處方3個(gè)，分別為方一、方二、方三，另從藥典查方一個(gè)，即方四。
　　各組

3、方分別用10倍的水浸泡20min，煎煮20min，倒出藥液，加水再煎20min，2次藥液合并、濃縮、離心后定容至生藥濃度為1g/ml，并消毒滅菌，4℃保存，備用。
　　將360只1日齡健康肉仔雞隨機(jī)分成12組，每組30只，即正常對(duì)照組、感染對(duì)照組、方一預(yù)防組、方二預(yù)防組、方三預(yù)防組、方四預(yù)防組、慶大預(yù)防組、方一治療組、方二治療組、方三治療組、方四治療組和慶大治療組。
　　預(yù)防組1日齡雛雞常規(guī)飼養(yǎng)預(yù)飼3d后（第4d），中藥預(yù)防

4、組將4個(gè)中藥復(fù)方制劑分別按飼料1％的比例混入各對(duì)應(yīng)組飲水中，分上、下午2次給藥，連續(xù)飲用12d。慶大預(yù)防組常規(guī)飼養(yǎng)第9d混飲慶大霉素注射液2000IU/只/次，2次/日，連續(xù)飲用6d；復(fù)方中藥組用藥第7d、慶大預(yù)防組用藥第2d和感染對(duì)照組同時(shí)每只雞胸肌注射大腸桿菌菌液1mL(含菌量為5.40×106/mL)攻毒，正常對(duì)照組不攻毒，不喂藥，胸肌注射生理鹽水1ml，觀察10d，統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
　　治療組常規(guī)飼養(yǎng)至10d的

5、雛雞胸肌注射大腸桿菌液1.00ml/只攻毒，攻毒后中藥治療試驗(yàn)組雞立即按飼料的2%給藥，2次/日，混飲，每天上、下午各1次，連用6d；慶大霉素治療組雞立即混飲慶大霉素4000IU/只/次，2次/日，上、下午各1次，連用6d；正常對(duì)照組胸肌注射生理鹽水(1.00ml/只)，觀察10d，統(tǒng)計(jì)發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
　　通過(guò)對(duì)四種中藥組方預(yù)防和治療效果比較，結(jié)果表明方二（即加味白頭翁湯）的效果最好，確定為本研究的最佳中藥組方。

6、　　2.加味白頭翁湯最佳臨床用量的確定
　　將300只1日齡健康肉仔雞隨機(jī)分成10組，正常對(duì)照組、感染對(duì)照組、方二預(yù)防低劑量組、方二預(yù)防中劑量組、方二預(yù)防高劑量組、慶大預(yù)防組、方二治療低劑量組、方二治療中劑量組、方二治療高劑量組和慶大治療組，每組30只。
　　用高、中、低三個(gè)不同劑量的方二對(duì)人工感染肉仔雞大腸桿菌病進(jìn)行治療和預(yù)防保護(hù)性試驗(yàn)，肉仔雞處理方法同前。
　　結(jié)果表明使用高、中、低不同劑量的加味白頭翁湯，均可降低

7、雞的發(fā)病率和死亡率，通過(guò)防治效果比較，加味白頭翁湯中劑量為最佳劑量（預(yù)防量為飼料的0.75%、治療量為飼料的1.5%）。
　　3.加味白頭翁湯抗大腸桿菌機(jī)理
　　將240只1日齡健康肉仔雞隨機(jī)分成8組，每組30只，正常對(duì)照組、感染對(duì)照組、方二中劑量預(yù)防組、方二高劑量預(yù)防組、慶大預(yù)防組、方二中劑量治療組、方二高劑量治療組、慶大治療組。肉仔雞處理方法同前。測(cè)定以下指標(biāo)：
　　方二對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響：分別在藥物預(yù)防階段0

8、d、3d、6d時(shí)，每只雞稱重，稱料，計(jì)算每組試驗(yàn)雞平均增重和平均累積料肉比。與正常對(duì)照組比較計(jì)算相對(duì)增重率。分別在接種大腸桿菌后（藥物治療階段）0d、3d、6d、9d、12d、15d時(shí)，每只雞稱重，計(jì)算每只雞的平均增重；并與感染對(duì)照組比較計(jì)算相對(duì)增重率。
　　方二對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)的測(cè)定：分別在接種大腸桿菌后，0d、3 d、6d、9d、12d、15d，每組隨機(jī)取試驗(yàn)雞5只分別無(wú)菌心臟采集血液5ml，血液經(jīng)離心機(jī)3000r/min

9、離心，取其血清，測(cè)定雛雞血液中轉(zhuǎn)氨酶的活性；雛雞血液中蛋白的含量。
　　方二對(duì)肉仔雞抗氧化能力的測(cè)定：取肝勻漿上清液，檢測(cè)肉仔雞攻毒后0d、3d、6d、9d、12d、15d SOD的活性和MDA的含量。
　　方二對(duì)肉仔雞免疫功能的影響：于預(yù)防用藥后0d、3d、6d從4組試驗(yàn)雞分別隨機(jī)抽取5只，無(wú)菌采心血分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），測(cè)定T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞的活化情況；Ea一玫瑰花環(huán)的形成率的影響；紅細(xì)胞C3b受體（E-

10、C3bRR）花環(huán)形成率的影響。
　　結(jié)果表明加味白頭翁湯能顯著提高病雞相對(duì)增重率、SOD活性、雞血清蛋白（總蛋白、白蛋白和球蛋白）含量、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、Ea-玫瑰花環(huán)形成率、紅細(xì)胞C3b受體（E-C3bRR）花環(huán)形成率；顯著降低肉仔雞血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（Alt）、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性（Ast）、Ast/Alt比值、肝臟中MDA含量。
　　上述結(jié)果表明，本研究中所選擇的四種中藥處方中，以處方2即“加味白頭翁湯”對(duì)大腸桿菌病雞具有顯著的