加味白頭翁湯對肉仔雞大腸桿菌病的防治效果研究.pdf

1、肉雞大腸桿菌病是臨床上常見的禽病之一，具有發(fā)病快、死亡率高的特點，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)造成了極大的危害。隨著肉雞養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展和集約化程度的提高，肉仔雞大腸桿菌流行勢頭愈加猛烈，給肉雞生產(chǎn)造成了嚴重損失。長期以來，對于大腸桿菌病多采用抗生素等藥物進行防治，由于抗生素等化學藥物的不合理應用，導致大腸桿菌的耐藥譜不斷擴大，且易在禽體內形成殘留，嚴重影響了人類健康和公共衛(wèi)生安全。中草藥及中藥組方制劑對禽大腸桿菌病有較好的防治效果，并具有殘留低、治愈

2、率高、不易產(chǎn)生耐藥性等特點，符合當今社會倡導的綠色養(yǎng)殖的行業(yè)要求，有著廣闊的應用前景。雖然中藥防治肉雞大腸桿菌病的研究很多，但還存在著許多制約其推廣應用的難點。本研究目的是篩選出防治雞大腸桿菌病的最佳中藥組方，并對其臨床療效及其機理作初步的探討，為其進一步應用于生產(chǎn)實踐提供理論依據(jù)。
　　1.中藥組方篩選
　　根據(jù)中獸醫(yī)整體觀念和辨證論治理論自擬中藥處方3個，分別為方一、方二、方三，另從藥典查方一個，即方四。
　　各組

3、方分別用10倍的水浸泡20min，煎煮20min，倒出藥液，加水再煎20min，2次藥液合并、濃縮、離心后定容至生藥濃度為1g/ml，并消毒滅菌，4℃保存，備用。
　　將360只1日齡健康肉仔雞隨機分成12組，每組30只，即正常對照組、感染對照組、方一預防組、方二預防組、方三預防組、方四預防組、慶大預防組、方一治療組、方二治療組、方三治療組、方四治療組和慶大治療組。
　　預防組1日齡雛雞常規(guī)飼養(yǎng)預飼3d后（第4d），中藥預防

4、組將4個中藥復方制劑分別按飼料1％的比例混入各對應組飲水中，分上、下午2次給藥，連續(xù)飲用12d。慶大預防組常規(guī)飼養(yǎng)第9d混飲慶大霉素注射液2000IU/只/次，2次/日，連續(xù)飲用6d；復方中藥組用藥第7d、慶大預防組用藥第2d和感染對照組同時每只雞胸肌注射大腸桿菌菌液1mL(含菌量為5.40×106/mL)攻毒，正常對照組不攻毒，不喂藥，胸肌注射生理鹽水1ml，觀察10d，統(tǒng)計發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
　　治療組常規(guī)飼養(yǎng)至10d的

5、雛雞胸肌注射大腸桿菌液1.00ml/只攻毒，攻毒后中藥治療試驗組雞立即按飼料的2%給藥，2次/日，混飲，每天上、下午各1次，連用6d；慶大霉素治療組雞立即混飲慶大霉素4000IU/只/次，2次/日，上、下午各1次，連用6d；正常對照組胸肌注射生理鹽水(1.00ml/只)，觀察10d，統(tǒng)計發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)和存活數(shù)。
　　通過對四種中藥組方預防和治療效果比較，結果表明方二（即加味白頭翁湯）的效果最好，確定為本研究的最佳中藥組方。

6、　　2.加味白頭翁湯最佳臨床用量的確定
　　將300只1日齡健康肉仔雞隨機分成10組，正常對照組、感染對照組、方二預防低劑量組、方二預防中劑量組、方二預防高劑量組、慶大預防組、方二治療低劑量組、方二治療中劑量組、方二治療高劑量組和慶大治療組，每組30只。
　　用高、中、低三個不同劑量的方二對人工感染肉仔雞大腸桿菌病進行治療和預防保護性試驗，肉仔雞處理方法同前。
　　結果表明使用高、中、低不同劑量的加味白頭翁湯，均可降低

7、雞的發(fā)病率和死亡率，通過防治效果比較，加味白頭翁湯中劑量為最佳劑量（預防量為飼料的0.75%、治療量為飼料的1.5%）。
　　3.加味白頭翁湯抗大腸桿菌機理
　　將240只1日齡健康肉仔雞隨機分成8組，每組30只，正常對照組、感染對照組、方二中劑量預防組、方二高劑量預防組、慶大預防組、方二中劑量治療組、方二高劑量治療組、慶大治療組。肉仔雞處理方法同前。測定以下指標：
　　方二對肉仔雞生長性能的影響：分別在藥物預防階段0

8、d、3d、6d時，每只雞稱重，稱料，計算每組試驗雞平均增重和平均累積料肉比。與正常對照組比較計算相對增重率。分別在接種大腸桿菌后（藥物治療階段）0d、3d、6d、9d、12d、15d時，每只雞稱重，計算每只雞的平均增重；并與感染對照組比較計算相對增重率。
　　方二對肉仔雞血液生化指標的測定：分別在接種大腸桿菌后，0d、3 d、6d、9d、12d、15d，每組隨機取試驗雞5只分別無菌心臟采集血液5ml，血液經(jīng)離心機3000r/min

9、離心，取其血清，測定雛雞血液中轉氨酶的活性；雛雞血液中蛋白的含量。
　　方二對肉仔雞抗氧化能力的測定：取肝勻漿上清液，檢測肉仔雞攻毒后0d、3d、6d、9d、12d、15d SOD的活性和MDA的含量。
　　方二對肉仔雞免疫功能的影響：于預防用藥后0d、3d、6d從4組試驗雞分別隨機抽取5只，無菌采心血分離外周血單個核細胞（PBMC），測定T淋巴細胞、B淋巴細胞的活化情況；Ea一玫瑰花環(huán)的形成率的影響；紅細胞C3b受體（E-

10、C3bRR）花環(huán)形成率的影響。
　　結果表明加味白頭翁湯能顯著提高病雞相對增重率、SOD活性、雞血清蛋白（總蛋白、白蛋白和球蛋白）含量、T淋巴細胞轉化率、Ea-玫瑰花環(huán)形成率、紅細胞C3b受體（E-C3bRR）花環(huán)形成率；顯著降低肉仔雞血清谷丙轉氨酶（Alt）、谷草轉氨酶活性（Ast）、Ast/Alt比值、肝臟中MDA含量。
　　上述結果表明，本研究中所選擇的四種中藥處方中，以處方2即“加味白頭翁湯”對大腸桿菌病雞具有顯著的