GluCI受體在小菜蛾對(duì)阿維菌素抗性中的作用研究.pdf

1、小菜蛾是十字花科蔬菜上一種非常重要的世界性害蟲。阿維菌素作為一種高效低毒的抗生素類殺蟲劑,對(duì)小菜蛾具有很好的殺蟲效果。但是由于大范圍的長(zhǎng)期單一使用,致田間小菜蛾很快對(duì)其產(chǎn)生了抗性。GluCl受體是阿維菌素的主要作用靶標(biāo),GluCl受體在小菜蛾對(duì)阿維菌素抗性中的作用尚不清楚。本研究通過(guò)室內(nèi)抗藥性篩選、不同抗性品系GluClα亞基基因差異位點(diǎn)分析、以及GluClα亞基基因相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定,來(lái)闡明GluCl受體在小菜蛾對(duì)阿維菌素抗性中的作用。

2、
　　 一、小菜蛾對(duì)阿維菌素的室內(nèi)抗性篩選
　　 小菜蛾最初采于福建田間,在室內(nèi)飼養(yǎng)約5年后用阿維菌素進(jìn)行抗性汰選。本實(shí)驗(yàn)是在前期已進(jìn)行汰選2年的基礎(chǔ)上繼續(xù)選育,抗性倍數(shù)由20.85倍上升到218.92倍,達(dá)到了較高的抗性水平。該種群在最初篩選的兩年時(shí)間里,抗性發(fā)展非常緩慢。但是隨著汰選次數(shù)的逐漸增加,抗性個(gè)體的比率顯著上升。
　　 二、不同抗性水平的小菜蛾GluClα亞基基因的差異位點(diǎn)分析
　　 分別克

3、隆了室內(nèi)汰選的福建抗性品系(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是180倍),廣州抗性品系(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是30倍),田間采集的廣東惠州種群(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是217倍)、云南彌渡種群(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是513倍)、云南通海種群(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是680倍)以及海南種群(對(duì)阿維菌素的抗性倍數(shù)是534倍)小菜蛾GluClα亞基基因。對(duì)所獲得的多個(gè)拷貝序列GluClα亞基基因進(jìn)行序列比對(duì)后發(fā)現(xiàn),共有16個(gè)位點(diǎn)發(fā)生了核苷酸的變異,其中只有4

4、個(gè)位點(diǎn)引起了氨基酸的變異,其他位置還有序列的替換、缺欠和插入。這些變異中,四個(gè)氨基酸的變異只是同時(shí)出現(xiàn)在室內(nèi)飼養(yǎng)的廣州汰選和福建汰選種群中,在其他抗性種群中沒(méi)有發(fā)現(xiàn),其他三個(gè)位置的序列替換、缺失和插入變異則普遍存在各抗性種群中,各種群之間沒(méi)有明顯的差異。
　　 三、不同抗性水平的小菜蛾GluClα亞基基因的相對(duì)表達(dá)量分析
　　 采用實(shí)時(shí)熒光定量的方法,分別對(duì)福建敏感品系和福建抗性品系小菜蛾卵、一齡、二齡、三齡、四齡幼蟲的