煙粉虱對(duì)多殺菌素和阿維菌素的抗性監(jiān)測(cè)及生化機(jī)理研究.pdf

1、煙粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一種世界性的入侵害蟲(chóng)，給我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。MEAM1和MED是煙粉虱兩個(gè)重要的外來(lái)入侵隱種，在我國(guó)部分地區(qū)常混合發(fā)生，對(duì)我國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了不同程度的危害和損失。尤其是MED隱種危害寄主范圍更廣，對(duì)多種殺蟲(chóng)劑具有較高抗性，防治上更為困難。近年來(lái)，由于有機(jī)合成農(nóng)藥的大量使用，煙粉虱的抗藥性問(wèn)題日趨嚴(yán)重。當(dāng)前氨基甲酸酯和有機(jī)磷等常規(guī)殺蟲(chóng)劑已使煙粉虱產(chǎn)生了較高水平的抗性，在

2、一些地區(qū)煙粉虱也對(duì)煙堿類殺蟲(chóng)劑及昆蟲(chóng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑產(chǎn)生了抗性。當(dāng)前迫切需要廣泛開(kāi)展煙粉虱抗藥性監(jiān)測(cè)，篩選防治煙粉虱的高效、低毒、安全的藥劑新品種。本文通過(guò)TaqMan等位基因技術(shù)鑒定煙粉虱兩入侵隱種，開(kāi)展了煙粉虱對(duì)多殺菌素和阿維菌素的抗藥性監(jiān)測(cè)，并對(duì)其抗性生化機(jī)理進(jìn)行研究，對(duì)煙粉虱的抗性治理和綜合防治具有重要的意義。主要研究結(jié)果如下：
　　 ⑴選擇線粒體細(xì)胞色素氧化酶(I)(mitochondrial cytochrome oxid

3、ase(I)，mtDNA COI)基因保守區(qū)域內(nèi)的單核苷酸多態(tài)性(SNP)為靶標(biāo)，應(yīng)用等位基因聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)，借助TaqMan-MGB熒光染色標(biāo)記探針，建立了一種鑒定煙粉虱MEAM1和MED隱種的等位基因選擇性PCR方法，并對(duì)北京11個(gè)區(qū)縣的14個(gè)煙粉虱種群的進(jìn)行了隱種鑒定。結(jié)果表明，北京地區(qū)14個(gè)煙粉虱種群樣本與已知煙粉虱MED隱種種群在熒光值分布上聚為一簇，為MED隱種。
　　 ⑵進(jìn)行煙粉虱不同發(fā)育階段對(duì)多殺菌素和阿維菌

4、素的敏感性測(cè)定，結(jié)果表明，多殺菌素和阿維菌素對(duì)煙粉虱的卵均沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的毒殺作用，不同濃度藥劑和對(duì)照處理的卵相比，MED隱種煙粉虱卵的孵化率均在94％-97％之間，MEAM1隱種煙粉虱卵的孵化率均在91％-93％之間。兩種藥劑對(duì)煙粉虱的若蟲(chóng)和成蟲(chóng)均具有較高的生物活性，且成蟲(chóng)期為最佳防治時(shí)期，皆可作為防治煙粉虱的優(yōu)良藥劑。其中阿維菌素對(duì)煙粉虱若蟲(chóng)和成蟲(chóng)的毒力更強(qiáng)，對(duì)若蟲(chóng)的LC50最低的為0.26mg/L，對(duì)成蟲(chóng)的LC50最低的僅為0.0

5、3mg/L。與多殺菌素相比，煙粉虱對(duì)阿維菌素的敏感性更高。
　　 ⑶在測(cè)定多殺菌素和阿維菌素對(duì)煙粉虱毒力的基礎(chǔ)上，研究其致死中濃度對(duì)煙粉虱解毒系統(tǒng)生理生化的影響。結(jié)果表明，多殺菌素和阿維菌素作為外源有害物質(zhì)，能有效干擾煙粉虱體內(nèi)羧酸酯酶、乙酰膽堿酯酶和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶的活性，誘導(dǎo)昆蟲(chóng)自身解毒酶系做出應(yīng)激反應(yīng)。其中，多殺菌素對(duì)煙粉虱羧酸酯酶具有明顯的激活作用，取食8h后酶活力顯著高于對(duì)照(P＜0.01)，處理后48h激活作用最