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1、本研究采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將反義蠟質(zhì)基因(Waxy基因)導(dǎo)入雜交稻親本,并對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響因素進(jìn)行了探討。結(jié)論如下: 利用攜帶反義蠟質(zhì)基因和潮霉素抗性基因的雙元載體p13w4質(zhì)粒對(duì)粳型稻廣粳1號(hào)和秈型稻特青進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化。同時(shí),利用分別攜帶反義蠟質(zhì)基因的p13w8質(zhì)粒和含抗潮霉素抗性基因的p1300質(zhì)粒對(duì)秈稻品種進(jìn)行了共轉(zhuǎn)化研究。經(jīng)PCR檢測(cè)證明,兩種轉(zhuǎn)化方式都獲得了外源基因整合進(jìn)染色體組的轉(zhuǎn)基因水稻植株。對(duì)轉(zhuǎn)基因植株后代進(jìn)行栽培,大
2、多數(shù)T0代和T1代都能正常結(jié)實(shí)。PCR檢測(cè)表明,T1群體中目的基因與標(biāo)記基因已發(fā)生了分離,其中,從采用共轉(zhuǎn)化方式獲得的轉(zhuǎn)基因植株后代中獲得了僅含目的基因而不含抗性標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因植株。 水稻遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程中,內(nèi)源激素的含量及變化影響著愈傷組織的生理狀態(tài)。IAA主要存在于種胚誘導(dǎo)出的愈傷組織上及芽中,且過(guò)高的IAA含量不利于愈傷組織的誘導(dǎo)和生長(zhǎng);GA通過(guò)與IAA的互作效應(yīng)來(lái)調(diào)控愈傷組織的生長(zhǎng)狀態(tài),較高的IAA、GA含量能夠促進(jìn)愈傷組
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