超級雜交稻骨干親本DNA指紋圖譜構(gòu)建與PyTPS轉(zhuǎn)基因水稻抗?jié)B透脅迫的研究.pdf

1、本研究分為兩部分：第一部分構(gòu)建超級雜交稻骨干親本DNA指紋圖譜的研究，選擇與Y58S有近緣遺傳關(guān)系并在當前雜交水稻育種中廣泛應用的7個骨干光溫敏不育系及Y58S與9311配組選育的超級雜交稻Y兩優(yōu)1號等18個雜交水稻品種，作為構(gòu)建DNA指紋圖譜的材料。運用SSR分子標記技術(shù)對以上材料進行檢測，從60對引物中選擇出12對具有穩(wěn)定、清晰擴增產(chǎn)物的引物，用它們擴增得到的72條標記，對構(gòu)建DNA指紋圖譜所用的18個材料進行聚類分析。從這12對引

2、物中選擇3對引物擴增出的14條多態(tài)標記構(gòu)建了這18個材料的DNA指紋圖譜，為Y58S的種質(zhì)鑒定提供了多重保障，并為Y58S作為母本的雜交組合進行品種鑒定和雜交種純度分子鑒定奠定了基礎(chǔ)。第二部分研究以轉(zhuǎn)化條斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PyTPS)的T3代轉(zhuǎn)基因水稻株系TPS191-1和TPS155-4為材料，用PCR和southern雜交檢測轉(zhuǎn)基因水稻株系中攜帶的條斑紫菜TPS基因，并使用PEG 6000和NaCl的濃度梯度溶液處理培

3、養(yǎng)15天的實生苗，來模擬干旱和鹽脅迫兩種滲透脅迫，通過測定苗高和電導率研究轉(zhuǎn)基因水稻株系的抗?jié)B透脅迫表型。最后，通過RT-PCR檢測轉(zhuǎn)基因植株在抗性表型差異明顯的處理下PyTPS基因的轉(zhuǎn)錄水平。獲得主要結(jié)論如下： 1.聚類分析結(jié)果表明：18個供試材料的相似度在0.672到0.945之間，并最終在相似度為0.672處被分為兩個組。其中供試材料中的兩個雜交組合Y兩優(yōu)1號和兩優(yōu)培九及其父本9311，以及另一恢復系B163被分到了一組，

4、而其它骨干恢復系和所有不育系被分到了另一組；而另一組在相似度為0.72處又被分為了兩組。 2.本研究選用RM164、RM18和RM258擴增出的14條多態(tài)標記構(gòu)建的DNA指紋圖譜中，每個雜交稻品種都具有特異的DNA指紋，可以彼此相區(qū)別從而達到種質(zhì)鑒定的目的。 3.RM164擴增的三條特異標記可以通過父母本的互補標記有效的鑒別Y兩優(yōu)1號和兩優(yōu)培九兩個超級雜交稻先鋒品種。 4.RM164還擴增得到了在Y58S及其親本