轉3α-HSD基因水稻后代遺傳特性以及對土壤細菌影響研究.pdf

1、以農(nóng)桿菌介導轉3α-HSD基因的水稻為試驗材料,采用分子手段、農(nóng)藝性狀及品質(zhì)性狀考察,從時間和空間的角度,檢測轉基因后代的遺傳特性；通過對轉基因水稻種植土壤中分離得到的以膽固醇為碳源的細菌的種群鑒定,研究轉基因水稻對種植環(huán)境細菌種群的影響。探討轉3α-HSD基因水稻后代的遺傳性狀的穩(wěn)定性和種植環(huán)境的安全性為此轉基因水稻育種價值做初步研究?，F(xiàn)得出主要結果如下:
　　 1.經(jīng)轉3α—HSD基因水稻T4、T5、T6代數(shù)據(jù)分析,可以看出

2、后代轉基因的陽性植株出現(xiàn)頻率基本穩(wěn)定,平均可以達到90％以上,說明該基因可以穩(wěn)定遺傳；在根部,花粉和籽粒中都檢測到目的基因,說明目的基因在水稻各個部位都穩(wěn)定存在。
　　 2.轉3α—HSD基因水稻分蘗期、孕穗期和抽穗期的檢測結果顯示,根部的目的蛋白在世代間隨著生長發(fā)育期逐漸有穩(wěn)定的趨勢,T5代和T6代差異不顯著。隨生長發(fā)育含量慢慢增加,抽穗期的含量最高,平均高達2.56μg／g,分蘗期含量最低,低至0.79μg／g。不同株系的世

3、代間表現(xiàn)為,部分可以穩(wěn)定遺傳,第1株系表達量高,平均為1.79μg／g,第5株系的表達量是最低的,平均為1.389μg／g；花粉和籽粒中目的蛋白的含量比較少,單位為ng／g,小一個數(shù)量級?；ǚ壑心康牡鞍譚5代和T6代無顯著差異,表明是逐漸穩(wěn)定。籽粒中目的蛋白含量在株系間的穩(wěn)定性趨勢良好,總體看第1株系的含量相對較高。
　　 3.品質(zhì)性狀分析表明,籽粒中的可溶性淀粉與可溶性蛋白質(zhì)含量與對照相比都是減少的,谷甾醇與對照相比含量也是減

4、少的,表明3α-HSD基因的表達產(chǎn)物對谷甾醇有降解作用,證明微生物基因轉導植物后仍然能行使其作用,其中第1株系谷甾醇含量是最低的,可溶性淀粉和可溶性蛋白質(zhì)含量與對照沒有明顯變化,表明它既能達到轉基因的目的又能對受體品質(zhì)影響最小,結合2中根部目的蛋白的檢測結果可知第1株系分子檢測與品質(zhì)性狀有相對應的關系。
　　 4.對農(nóng)藝性狀的考察表明,轉基因外部表形性狀基本穩(wěn)定,劍葉長,劍葉寬,穗長,世代株系間都穩(wěn)定,千粒重,結實率和株高世代間

5、穩(wěn)定,有效分蘗是在株系間穩(wěn)定,農(nóng)藝性狀測定項目都顯示穩(wěn)定。轉基因水稻農(nóng)藝性狀的整體表現(xiàn)是株高相對較高,千粒重增加但結實率降低,說明籽粒比較飽滿,但是存在空粒的比較多。
　　 5.花粉中檢測的目的基因條帶比較弱,檢測的3α-HSD蛋白含量比較低,說明該基因通過花粉途徑擴散風險較低,詳細判斷花粉的安全性,可以建立擴散模型進一步研究。
　　 6.土壤中分離得到以膽固醇為碳源的細菌,三種土壤中不同的菌種初步鑒定都是大腸桿菌。轉基