不同含油量甘藍型油菜品系比較蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、甘藍型油菜是重要的油料經(jīng)濟作物，是食用植物油的重要來源。高含油量已成為油菜育種的重要目標，目前對含油量形成的分子機理的了解仍然較少，蛋白質(zhì)組學實驗技術是研究種子含油量性狀的有用技術手段。本文首先建立了適合于甘藍型油菜雙向電泳的體系，然后利用該體系對不同含油量甘藍型油菜成熟種子總蛋白以及油體蛋白進行比較蛋白質(zhì)組學的研究，結(jié)果如下：
　　 （1）建立了一種適合甘藍型油菜的雙向電泳體系，找到了合適的蛋白提取方法和IEF 聚焦程序。研究

2、表明，采用TCA-丙酮提取方法、pH 4-7 范圍膠條以及改進的IEF 聚焦程序，可以得到較好的蛋白質(zhì)雙向電泳結(jié)果。所建立的實驗體系在甘藍型油菜的幼苗、葉片、莖和種子中，都能得到較好的蛋白質(zhì)雙向電泳結(jié)果，表明該體系對甘藍型油菜普遍適用，為油菜蛋白質(zhì)組學的研究打下了基礎。
　　 （2）通過TEM 技術比較研究了不同含油量甘藍型油菜油體解剖結(jié)構(gòu)的差異，結(jié)果表明，高含油量的種子一般油體形態(tài)都比較小且排列緊密；低含油量的種子一般油體形態(tài)

3、較大且出現(xiàn)超大油體結(jié)構(gòu)，大體積的油體，特別是超大油體，對于細胞空間的利用率，遠遠不及小油體緊密排列的結(jié)構(gòu)，不利于油份的積累和儲藏，最終含油量也相對較低。進一步分析可知，低含油量種子的種胚中，蛋白質(zhì)儲藏腔明顯多于高含油量種子的種胚，這表明低含油量種子儲藏蛋白的能力較高含油量種子強，其總蛋白質(zhì)的含量也相對較高。
　　 （3）通過對不同含油量甘藍型油菜成熟種子總蛋白的2-DE 差異蛋白質(zhì)組研究，共鑒定出120個差異蛋白，這些蛋白按照功

4、能可分為碳水化合物代謝蛋白、細胞增殖/分裂蛋白、細胞防御蛋白、氨基酸合成蛋白、蛋白質(zhì)合成蛋白、次生代謝蛋白、儲藏蛋白、轉(zhuǎn)運蛋白以及不明分類蛋白9 大類。進一步分析可知，絕大部分差異點蛋白均屬于儲藏蛋白、細胞防御蛋白、碳水化合物代謝蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白，這表明脂肪酸含量差異的形成，是一個極為復雜的生理生化過程。
　　 （4）通過對不同含油量甘藍型油菜成熟種子油體蛋白的2-DE 差異蛋白質(zhì)組研究，共鑒定出34個差異蛋白，這些蛋白按照功能可