大蒜四倍體植株誘導與鑒定.pdf

1、本試驗用大蒜鱗莖和氣生鱗莖通過田間秋水仙素注射或者播種前浸泡處理誘導四倍體產(chǎn)生；同時進行組織培養(yǎng)誘導四倍體,在其愈傷組織狀態(tài)時用秋水仙素處理,然后誘導生芽生根,長成植株,并鑒定植株倍性。比較二倍體與四倍體植株在大田生長狀態(tài),生理生化特性以及營養(yǎng)品質(zhì)等方面的不同。結(jié)果表示： 1.田間注射大蒜總苞,秋水仙素浸泡大蒜鱗莖以及發(fā)芽期用秋水仙素處理鱗莖和氣生鱗莖,結(jié)果都是0.025％秋水仙素處理的愈傷組織得到的嵌合體比率最高,分別為35.

2、7％,22.3％,28.4％；航天搭載試驗中嵌合體植株有13棵,變異率為52％。 2.MS+2,4-D2mg/L+6-BA1mg/L+NAA0.2mg/L利于大蒜愈傷組織的產(chǎn)生,MS+NAA1mg/L+6-BA4mg/L是適宜于愈傷組織增殖和芽分化的最佳培養(yǎng)基。無激素的培養(yǎng)基利于生根；繼代2次的愈傷組織的芽分化能力最強。0.02％的秋水仙素利于四倍體的產(chǎn)生；高濃度的生長素有利于大蒜愈傷組織的誘導,但并不利于其分化。 3.

3、影響大蒜組織培養(yǎng)的因素：(1)培養(yǎng)基類型：三種類型培養(yǎng)基中以MS培養(yǎng)基的出愈率(86.05％)最高,與B5培養(yǎng)基(65.85％)差異顯著,而與1/2MS(72.92％)差異不顯著。(2)大蒜品種：蘇聯(lián)蒜,蒼山蒜和二水早三種基因型中以蘇聯(lián)改良蒜的出愈率最高,為73.53％,明顯高于蒼山、二水早。(3)切塊大小和插入培養(yǎng)基深淺：鱗莖切塊為0.3厘米見方時出愈率最高,切塊太大,容易產(chǎn)生雪花狀愈傷組織；切塊太小,容易產(chǎn)生褐化現(xiàn)象。插入培養(yǎng)基1/

4、3處時出愈率最高,為86％。插入過淺,營養(yǎng)吸收不夠,出愈率低；插入過深,氧氣不足,容易產(chǎn)生褐化。(4)其他影響因素：加入硝酸銀之后,出愈率提高約10％,且試管苗玻璃化程度明顯降低；加入活性炭對于愈傷組織的產(chǎn)生無影響；培養(yǎng)基中單獨或混合加入抗生素,對愈傷組織出愈率無影響,僅可降低污染率16-20％。 4.大蒜四倍體植株與二倍體植株生長發(fā)育和生理生化特性的比較：在植株外部形態(tài)上,較之二倍體,四倍體植株粗壯、節(jié)間較短。其假莖粗、假莖長

5、、葉長和葉寬在整個生長期始終大于二倍體。同時期四倍體大蒜的平均葉片數(shù)略低于二倍體,但葉片總數(shù)與之基本相同。四倍體大蒜葉面積更大,使其光合作用及呼吸作用明顯高于二倍體,有利于植株的生長,從而提高大蒜的產(chǎn)量與品質(zhì)。但生長過程中四倍體有的葉片出現(xiàn)畸形。四倍體大蒜具有更強大的根系：在旺盛生長期,四倍體根系平均重量和平均體積分別約為二倍體的1.63倍和1.44倍；總吸收面積和活躍吸收面積也顯著高于二倍體。與二倍體相比,四倍體的抗氧化酶(SOD,P

6、OD,CAT)活力高,使得其MDA維持在較低水平。葉片中MDA含量與二倍體基本相同,但蒜頭中MDA是二倍體的77.6％。四倍體大蒜蒜薹的平均單薹長度、平均單薹直徑、總苞長度和橫莖：鱗莖的平均單頭鮮重、平均蒜頭橫徑、蒜瓣背寬均顯著地高于二倍體。 5.四倍體大蒜與二倍體產(chǎn)品品質(zhì)的比較：四倍體大蒜蒜薹、鱗莖的各營養(yǎng)指標均高于二倍體。蒜薹和鱗莖中游離氨基酸分別高出8.18％和10.33％,可溶性蛋白高出67.18％和74.39％,可溶性