利用RAPD,ISSR,SRAP標記方法對白樺遺傳多樣性的研究.pdf

1、白樺(Betula platyphylla)耐寒性強、適應性好、生長速度快,是我國極為重要的山地造林樹種之一,為了進一步提高白樺育種的效率和制定科學合理的種質資源保護策略,則就必要對其遺傳多樣性進行全面而系統(tǒng)的研究。本項研究通過不同標記技術研究了白樺遺傳多樣性,主要研究結果如下:
　　 1、引物數量對白樺各遺傳參數影響不同
　　 以含有20個個體的15個白樺種源為材料,研究了SRAP不同標記數量(5、7、9、11、13、

2、15、17對)對白樺遺傳多樣性研究結果影響,結果表明:SRAP引物數量對揭示的白樺群體總位點數、多態(tài)位點數量、群體內與群體間遺傳變異和基因流研究結果產生極顯著和顯著影響,而對多態(tài)位點百分率影響不顯著。
　　 引物數量對不同種源遺傳距離和聚類結果均產生一定影響。引物數量為4對和7對時,遺傳距離最小的的種源分別是清源和寧夏與莫爾道嘎和桓仁,遺傳距離最大的種源分別是涼水和烏伊嶺與涼水和東方紅,此時15個種源分別聚成4類,種源間親緣關系

3、也不同。而引物數量11對以上時,遺傳距離大的種源均為涼水和草河口,遺傳距離最小的種源均為莫爾道嘎和桓仁。同時,15個種源分別聚成5個進化群體,而每個進化分枝中包含的種源基本相同。
　　 2、各種源樣本容量對白樺遺傳參數影響各異
　　 運用SRAP技術和17對引物,研究不同樣本容量(每個種源含有4、8、12、16、20個個體)對白樺遺傳參數的影響,結果表明:不同種源親本容量對白樺遺傳參數的影響不同,其中,樣本容量對白樺群體

4、多態(tài)位點百分率、群體內遺傳變異和群體間遺傳變影響顯著,對總位點數、多態(tài)位點數和基因流影響不顯著。
　　 樣本容量對不同種源遺傳距離和聚類結果均產生一定影響。每個種源個體數量超過8個時,遺傳距離最小和遺傳距離最大的種源均相同,而且15個種源的均聚成5個類群,每個類群中包含的種源也相同。每個種源數量為4個時,其遺傳距最小的種源分別是清源和寧夏種源,遺傳距離最大的種源是桓仁和烏伊嶺種源,而且15個種源聚類成6個類群。
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5、、基于不同標記技術的白樺遺傳多樣性研究
　　 (1)不同標記技術揭示的白樺遺傳多樣性結果不同
　　 分別采用15個RAPD引物、15個ISSR引物和15對SRAP引物對包含15個種源,每個種源含有20個隨機個體的白樺群體研究多樣性進行了研究,結果表明,引物數量相同和樣本容量相同的情況下,不同標記種類得到的白樺群體遺傳多樣性參數不同。如RAPD共檢測到186個位點,平均每個引物擴增出12.3個條帶,多態(tài)位點數185,多態(tài)位

6、點百分率99.46％?；蚨鄻有訦t為0.2394,群體內基因多樣性Hs為0.1948,群體間遺傳多樣性Gst為0.1862,81.37％的遺傳變異存在于群體內,18.63％的遺傳變異存在于群體間；ISSR共檢測到127個位點,其中多態(tài)位點124個,多態(tài)位點百分率達到97.64％,總基因多樣性Ht為0.3438,群體內基因多樣性Hs為0.1892,55.03％的遺傳變異存在于種群內,44.97％的遺傳變異存在于種源間；SRAP共檢測12

7、0個位點,其中多態(tài)位點118個,多態(tài)位點百分率達到98.33％,總基因多樣性Ht為0.2623,群體內基因多樣性Hs為0.1730,65.96％的遺傳變異存在于種群內,34.05％的遺傳變異存在于種源問。
　　 (2)基于不同標記的白樺遺傳多樣性參數之間相關性不同
　　 ISSR得到的各種遺傳參數分別與SRAP與RAPD遺傳參數之間呈顯著或極顯著相關(除SRAP與ISSR標記間有效等位基因數),而SRAP與RAPD標記得

8、到的各種遺傳參數相關性均不顯著
　　 (3)基于不同標記的白樺群體間的遺傳距離和聚類關系
　　 不同標記反映的各種源間親緣關系的遠近和聚類結果不同。RAPD技術反映出輝山和草河口親緣關系最近,ISSR為清源和寧夏,SRAP則為莫爾道嘎和桓仁種源；RAPD技術揭示的15個種源中,親緣關系最遠的兩個種源分別為莫爾道嘎和新疆,ISSR為淖爾和新疆,SRAP則為淖爾和涼水；RAPD將15個種源劃分為6個類群,而ISSR和SRAP