赤霉素調(diào)控半夏塊莖形成.pdf

1、半夏作為我國(guó)一種特有的藥用植物，它的原植物是天南星科多年生宿根草本植物Pinelliaternata（Thunb.）Briet，以塊莖入藥，富含多種有效成份，是一種重要的傳統(tǒng)中藥材和出口產(chǎn)品。近年來，由于一些農(nóng)藥和除草劑的廣泛使用，加上人們對(duì)野生半夏資源的過度采集，野生半夏資源已經(jīng)十分匱乏，而人工栽培繁殖力較低，加之半夏因病毒而引起的品種退化常導(dǎo)致種源不足、產(chǎn)量與品質(zhì)嚴(yán)重下降，這已成為半夏塊莖生產(chǎn)上的主要障礙之一。由于赤霉素對(duì)塊莖的形成

2、有著重要的調(diào)節(jié)作用，所以利用完善的半夏組織培養(yǎng)體系，以赤霉素合成抑制劑-矮壯素作為調(diào)節(jié)因子，研究赤霉素對(duì)試管塊莖的作用，這在變態(tài)器官的發(fā)育、農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)調(diào)控等方面方面都具有非常重要的意義。同時(shí)，我們借助SSH技術(shù)，構(gòu)建了赤霉素調(diào)控試管塊莖形成的相關(guān)基因的消減文庫。主要研究結(jié)果如下：
　　主要研究結(jié)果如下：
　　1．培養(yǎng)基中濃度的矮壯素，對(duì)半夏試管塊莖的誘導(dǎo)和塊莖內(nèi)素含量有一定的影響。在半夏試管塊莖形成過程中，矮壯素不僅能

3、有效抑制GA3的合成，而且促進(jìn)塊莖的形成，70mg·L-1的矮壯素對(duì)誘導(dǎo)塊莖的誘導(dǎo)效果影響最顯著。
　　2．對(duì)差減文庫進(jìn)行初步篩選和測(cè)序，獲得300個(gè)有效EST片段，經(jīng)過比對(duì)分析發(fā)現(xiàn)其中的18條EST為未知功能序列，其余EST均可推測(cè)出其同源基因或者蛋白功能。所獲得序列涉及糖類代謝、蛋白質(zhì)代謝、能量代謝、核酸轉(zhuǎn)錄與翻譯、信號(hào)傳導(dǎo)、膜轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞的分裂與生長(zhǎng)等一系列生物學(xué)過程。利用GO分類標(biāo)準(zhǔn)對(duì)EST從細(xì)胞組分，生物過程和

4、分子功能進(jìn)行了2級(jí)水平分類。
　　3.發(fā)現(xiàn)文庫中5個(gè)特異性EST序列分別與60S核糖體蛋白（60Sribosomalprotein，PtRSP60），26S核糖體RNA基因（26SribosomalRNAgene，PtRAR26），鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（zinctransporter，PtZT），12kD儲(chǔ)存蛋白（12kDstorageprotein，PtSP12），蘋果酸脫氫酶（malatedehydrogenase，PtMDH）基因同源