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1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文擬南芥ICE1通過(guò)調(diào)節(jié)赤霉素合成調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育姓名:陶?qǐng)@申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專(zhuān)業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:郝玉金張憲省20090616擬南芥ICEl通過(guò)調(diào)節(jié)赤霉素合成調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育表達(dá)模式,半定量RTPCR和Northern雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與野生型相比,突變體花中的AtMYB33、AtMYB65、AtMYBl01和AtMYBl20基因表達(dá)上調(diào)。3ICEl通過(guò)調(diào)控開(kāi)花相關(guān)基因影響開(kāi)花時(shí)間短日照條件下,icel一,突變體
2、的開(kāi)花時(shí)間比野生型早。進(jìn)而我們分析了開(kāi)花誘導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)模式。半定量RTPCR結(jié)果顯示,突變體中促進(jìn)擬南芥開(kāi)花的基因三FKCO和F丁表達(dá)上調(diào),而抑制開(kāi)花的基因FLC表達(dá)下調(diào)。4ICEl通過(guò)調(diào)控LECs基因影響種子發(fā)育icel,的成熟種子外表干癟,顯微觀察發(fā)現(xiàn),icelt突變體能發(fā)育出正常的球形胚、心形胚和魚(yú)雷胚,但隨后的發(fā)育受阻,不能形成正常大小和形狀的彎子葉胚,導(dǎo)致成熟胚不能充滿種皮,造成種子干癟。鑒于LECl、LEC2和FUS3等
3、是胚胎發(fā)育的重要調(diào)控基因,我們對(duì)這些基因的表達(dá)模式進(jìn)行了分析,實(shí)時(shí)定量RTPCR結(jié)果顯示,三嬲J(rèn)『、LEC2和FUS3在icel—f果莢中的表達(dá)升高,其中FUS3最明顯。5ICEl通過(guò)調(diào)控GA合成代謝相關(guān)基因影響內(nèi)源GA水平鑒于突變體的各種表型,我們懷疑ICEl能夠調(diào)控GA合成或代謝,因此對(duì)GA合成代謝關(guān)鍵酶基因的表達(dá)模式進(jìn)行了分析。實(shí)時(shí)定量RTPCR結(jié)果顯示,在icel,突變體中,GA合成相關(guān)基因AtGA30xl、AtGA30x2、A
4、tGA30x3、AtGA30x4和AtGA200xl的表達(dá)水平明顯升高,而GA分解代謝基因AtGA20x2表達(dá)水平則下降。激素測(cè)定也表明,突變體的內(nèi)源GA含量升高,表明ICEl基因抑制擬南芥的內(nèi)源GA合成。6ICEl蛋白與AtGA30x4基因啟動(dòng)子的順式元件結(jié)合染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)結(jié)果表明,在候選基因AtGA30xl、AtGA30x2、AtGA30x3、AtGA30x4、AtGA200xl和AtGA20x2中,ICEl蛋白能夠與
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