多花水仙離體培養(yǎng)及多倍體誘導(dǎo)技術(shù)研究.pdf

1、多花水仙為石蒜科水仙屬多年生球根類花卉，其球莖大，花朵多，開花期長，花香清雅，是具有較高觀賞價值和經(jīng)濟(jì)價值的一類花卉。由于多花水仙商品球繁殖率低，顏色單一，品種少，故改良水仙品種一直都是科學(xué)研究者們的研究重點。離體快速繁殖技術(shù)可以在極短的時間內(nèi)生產(chǎn)大量優(yōu)質(zhì)種苗，還可以用于人工種子的生產(chǎn)、原原種保存等工作，同時經(jīng)過染色體加倍的植株具有外形健壯，鱗片肥厚，高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)等優(yōu)點。因此，多花水仙的離體快繁和多倍體誘導(dǎo)的研究具有十分重要的理論和實際意義

2、。本研究以漳州水仙和黃花水仙為試驗材料，系統(tǒng)的研究了不同處理對鱗莖不同部位愈傷組織形成及分化的影響，從而篩選出最適漳州水仙和黃花水仙生長的培養(yǎng)基，為漳州水仙和黃花水仙的快速繁殖提供了技術(shù)指導(dǎo)，也為多花水仙的遺傳轉(zhuǎn)化等研究工作奠定了基礎(chǔ)；同時本試驗利用秋水仙素直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法來對漳州水仙和黃花水仙進(jìn)行多倍體誘導(dǎo)，比較了不同濃度秋水仙素和不同時間組合對漳州水仙和黃花水仙的誘變效果，試圖探索出誘導(dǎo)多倍體的技術(shù)和方法，為培育具有更高觀

3、賞價值和經(jīng)濟(jì)價值的水仙新品種奠定基礎(chǔ)。本研究主要獲得以下研究成果：
　　1.用不同部位的水仙帶盤鱗片為外植體，以小球莖誘導(dǎo)率和小球莖的質(zhì)量為主要因素來篩選最佳培養(yǎng)基。漳州水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.2mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT，漳州水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT，黃花水仙外層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg

4、/L2,4-D+0.1mg/L KT，黃花水仙中層鱗莖最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/L2,4-D+0.1mg/L KT。
　　2.本試驗通過對水仙的外層鱗莖和中層鱗莖進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，漳州水仙和黃花水仙外層的效果均不佳，容易褐化，影響了愈傷組織及小球莖的誘導(dǎo)。與外層鱗片相比，選擇漳州水仙和黃花水仙中層鱗莖作為外植體誘導(dǎo)效果較好。
　　3.在組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，利用秋水仙素的直接液體浸泡法和固體培養(yǎng)法，比

5、較不同秋水仙素濃度和不同時間組合對漳州水仙和黃花水仙的誘變效果。研究結(jié)果表明，兩種方法均能誘導(dǎo)出多倍體植株，但直接液體浸泡法比固體培養(yǎng)法的誘導(dǎo)率要高，死亡率也較高。
　　4.通過用不同的預(yù)處理方法對黃花水仙根尖進(jìn)行處理可以發(fā)現(xiàn)，秋水仙素、8-羥基喹啉、對二氯苯對中期染色體均有一定的凝縮作用，能達(dá)到較好的效果，而冰水對染色體的凝縮效果和分散效果均不佳；用0.2％秋水仙素處理8h的染色體形態(tài)較好，分散度適中，縊痕區(qū)比較清晰；用0.00

6、2 mol/L的8-羥基喹啉處理8h的染色體形態(tài)最好，分散度最好，縊痕區(qū)很清晰；用飽和對二氯苯溶液處理8h的染色體分散程度好，但凝縮效果不是很好，染色體較長，主縊痕和次縊痕不清晰。所以本試驗前處理采用0.002 mol/L的8-羥基喹啉液浸泡8 h。
　　5.經(jīng)秋水仙素誘導(dǎo)的植株與對照組植株比較發(fā)現(xiàn)，變異植株鱗莖變大，氣孔也顯著變大，單位面積內(nèi)氣孔個數(shù)明顯減少，對變異植株進(jìn)行染色體鑒定發(fā)現(xiàn)，漳州水仙中并未發(fā)現(xiàn)六倍體植株，黃花水仙中