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1、采用蠶豆葉片庫(kù)源轉(zhuǎn)換系統(tǒng)作為胞間連絲次生變化的研究系統(tǒng),運(yùn)用細(xì)胞化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)的方法,結(jié)合電鏡的超薄切片技術(shù),對(duì)纖維素酶、果膠酶、酸性磷酸酶、ATP酶以及過(guò)氧化物酶進(jìn)行了超微結(jié)構(gòu)水平的定位?! ?yīng)用韌皮部輸導(dǎo)示蹤劑6(5)CF的輸導(dǎo)對(duì)生長(zhǎng)2周的蠶豆葉片進(jìn)行了庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片及其庫(kù)區(qū)、源區(qū)和庫(kù)源轉(zhuǎn)換區(qū)的鑒定。輸導(dǎo)后應(yīng)用熒光顯微鏡觀察表明:蠶豆庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片的基部各級(jí)葉脈網(wǎng)絡(luò)中均能觀察到很強(qiáng)的熒光,熒光清晰,為葉片的庫(kù)區(qū);而在葉片的中部,6
2、(5)CF的熒光只在一級(jí)到二級(jí)葉脈中能看到,為葉片的庫(kù)源轉(zhuǎn)換區(qū);在葉尖部的熒光很弱甚至沒(méi)有,為葉片的源區(qū)。進(jìn)一步的電鏡水平的觀察顯示:在庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片源區(qū)的胞間連絲形態(tài)多樣,多為“H”型、“Y”型等分枝狀的胞間連絲結(jié)構(gòu),并且開始出現(xiàn)中央腔或者更復(fù)雜的分枝形態(tài)。在幼嫩時(shí)期葉片葉肉細(xì)胞和庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片的庫(kù)區(qū),胞間連絲的形態(tài)單一,大部分呈現(xiàn)直線型的簡(jiǎn)單結(jié)構(gòu)。觀察和統(tǒng)計(jì)表明:在葉片庫(kù)區(qū),簡(jiǎn)單的胞間連絲的數(shù)目占胞間連絲總數(shù)的絕大部分,為81%;在葉片
3、源區(qū)的部位,復(fù)雜分枝的胞間連絲的數(shù)目增加到80%?! ?duì)蠶豆幼嫩葉片(庫(kù)葉)、庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片葉肉細(xì)胞的不同部位進(jìn)行了ATP酶、過(guò)氧化物酶和酸性磷酸酶以及細(xì)胞壁的主要降解酶—纖維素酶和果膠酶的細(xì)胞化學(xué)及免疫細(xì)胞化學(xué)的定位。結(jié)果發(fā)現(xiàn):在幼嫩葉片和庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉的葉基部位,上述酶在細(xì)胞壁和胞間連絲處的活性較低,胞間連絲多為簡(jiǎn)單不分枝形態(tài);而在庫(kù)源轉(zhuǎn)換葉片的葉尖部位(源區(qū))發(fā)現(xiàn)在分枝的胞間連絲及其鄰近細(xì)胞壁上有纖維素酶、果膠酶、ATP酶、過(guò)氧化物酶
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