應用兩相分離技術研究紅壤中細菌及微生物量磷的組成.pdf

1、高度風化的酸性紅壤，受亞熱帶氣候及不合理利用影響，土壤養(yǎng)分含量偏低，尤其是土壤磷素的含量及有效性也很低。經(jīng)微生物固定和轉(zhuǎn)化的磷是紅壤中提供作物生長的主要磷素來源之一，如何提高這部分磷的有效性已越來越受到土壤和農(nóng)業(yè)科技工作者關注。 兩相分離技術(Aqueoustwo-phasepartitioningtechnique，簡寫為A2PP)近些年被廣泛應用于生物化學、細胞生物學等諸多領域，它是一種分離、純化生物大分子、細胞、病毒的方法

2、，但在國內(nèi)外鮮有應用于土壤領域的報道。該實驗借鑒國外有關研究結(jié)果，采集了鄂南幾種母質(zhì)發(fā)育、利用現(xiàn)狀不同的6個土壤樣品，把經(jīng)過分散處理后的土壤懸液，通過孔徑為20～30微米的濾膜真空抽濾，采用2％PEG和6％Dextran兩相系統(tǒng)純化細菌，測定細菌生物量和細菌磷的含量，研究兩相分離技術在土壤領域的可應用性以及應用此法初探紅壤微生物量磷的組成及其與土壤磷、理化性質(zhì)的關系，明確亞熱帶地區(qū)紅壤微生物量磷組分中的主要貢獻者。取得的主要結(jié)果有：

3、 1.采用0.1％膽酸鈉、鈉型離子交換樹脂、玻璃珠與土壤樣品一起在4℃振蕩2h，能夠較好的分散土壤中的細菌。采集的六個土樣細菌分離率介于0.41～0.60之間，母質(zhì)對分離效果有顯著的影響，不同母質(zhì)發(fā)育的紅壤相比，細菌分離率從高至低依次為：砂頁巖＞花崗巖＞第四紀紅色粘土。 2.實驗證明A2PP技術能夠較好地純化土壤中的細菌。 (1)在兩相系統(tǒng)中，采集的六個土樣細菌大部分被分離存在于上層PEG相中，純化后的細菌生物量達到

4、加入量的約63～78％。 (2)原始土樣與兩相分離體系分離純化的細菌經(jīng)染色、顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)原土樣的細菌多與土壤顆粒和有機質(zhì)結(jié)合在一起，而兩相分離技術能夠得到較為純凈的細菌個體。 (3)細菌的提取率介于0.31～0.48，不同母質(zhì)發(fā)育土壤細菌分離率存在差異，順序依次為：砂頁巖＞花崗巖＞第四紀紅色粘土。 3.嘗試應用A2PP法研究了細菌形態(tài)、微生物量磷組分等，揭示了真菌在紅壤磷循環(huán)中的積極作用。 (1)分

5、析了所采集的不同母質(zhì)發(fā)育的六個土樣的細菌結(jié)構(gòu)形態(tài)，這些土樣的細菌都以小球狀、小桿狀細菌為主。 (2)測定了微生物量磷組分。對采集的六個土樣而言，除茶園土外，菜園土和林地土壤均以真菌磷為主，且真菌磷占微生物量磷的比例為：林地＞菜地＞茶園。 (3)初步探明，在南方紅壤微生物量磷組分中，真菌在參與P循環(huán)和轉(zhuǎn)換過程中是積極的參與者。在連續(xù)提取法提取的磷形態(tài)以及土壤的理化性質(zhì)中，真菌磷與微生物量磷、水提取的有機磷有極好的線性相關性