刺參養(yǎng)殖池塘異養(yǎng)菌數(shù)量變動及區(qū)系組成的初步研究.pdf

1、刺參(Apostichopus japonicus)不含膽固醇，其體內(nèi)有豐富的生理活性物質(zhì)，具有極高的營養(yǎng)價值。自2002年以來，刺參養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，2005年全國海參養(yǎng)殖面積達(dá)到7.4萬公頃，產(chǎn)量達(dá)到6.5萬噸，產(chǎn)值接近80億元，其中山東的產(chǎn)量占88％以上，成為我國北方海水養(yǎng)殖的重要的特色支柱產(chǎn)業(yè)。但是，該產(chǎn)業(yè)在迅速發(fā)展的同時，一些嚴(yán)重的問題也逐漸顯現(xiàn)出來，如養(yǎng)殖環(huán)境惡化、產(chǎn)品品質(zhì)下降、養(yǎng)殖病害嚴(yán)重等。 微生物是生態(tài)系統(tǒng)的重要

2、組成部分，在養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)和能量流動中發(fā)揮著巨大作用。它既是生產(chǎn)者能，利用光能或簡單的無機(jī)物生產(chǎn)有機(jī)物質(zhì)，構(gòu)建細(xì)胞，又是消費(fèi)者、分解者和儲存者，是生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)和能量轉(zhuǎn)換的主要推動者。因此，無論是從刺參養(yǎng)殖技術(shù)的提高考慮，還是從刺參養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展考慮，研究刺參養(yǎng)殖池塘微生物生態(tài)都具有比較重要意義。 本文以刺參養(yǎng)殖池塘作為研究對象，研究了池塘水體、底泥、附著基以及刺參腸道中可培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)量及區(qū)系組成的周年變動情況。獲

3、得的主要結(jié)果如下： 1不投餌池塘環(huán)境和海參腸道中異養(yǎng)菌數(shù)量變動及區(qū)系組成研究 從2007年6月到2008年5月，對威海市榮成不投餌刺參養(yǎng)殖池塘內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境中和刺參腸道中的異養(yǎng)菌總活菌數(shù)周年變化進(jìn)行了調(diào)查，并分析了異養(yǎng)菌的區(qū)系組成。研究結(jié)果表明： 不投餌池塘餌池塘水中總活菌數(shù)現(xiàn)出春季到夏季升高，秋冬兩季下降的規(guī)律，水中總活菌數(shù)的數(shù)量變動春季在(0.3±0.1)×104～(0.5±0.1)×104cfu mL-1之間；

4、夏季變動在(0.4±0.2)×104～(0.8±0.0)×104cfu mL-1之間；秋季變動在(0.5±0.3)×104～(2.1±1.4)×104cfu mL-1之間變化；冬季變動在(0.3±0.2)×104～(0.5±0.1)×104cfu mLk-1之間：在底泥中總活菌數(shù)在夏季和秋季(7、8、10月)數(shù)量較高，而在冬季和初春數(shù)量開始下降。這與水中總活菌數(shù)的變動趨勢相似，底泥中總活菌數(shù)的數(shù)量春季變動在(4.3±0.01)×104c

5、fu g-1～(2.7±0.2)×105 cfu g-1之間；夏季變動在(2.7±0.7)×105 cfu g-1～(4.0±1.0)×105 cfu g-1之間；秋季變動在(4.3±1.1)×105 cfu g-1～(4.4±0.1)×105 cfu g-1之間變化；冬季變動在(7.1±1.3)×104 cfu g-1～(1.9±0.4)×105cfu g-1之間；在附著基上總活菌數(shù)量隨季節(jié)變化有所不同，附著基上的活菌總數(shù)在冬季(10

6、月至1月)較高，而在春季和夏季較低。附著基上總活菌數(shù)春季變動在(1.6±0.2)×104～(1.7±0.3)×105cfu g-1之間；夏季變動在(6.4±2.3)×104～(3.3±1.2)×105cfu g-1之間；秋季變動在(5.3±2.0)×105～(6.0±1.9)×105cfu g-1之間變化；冬季變動在(1.2±0.4)×106～(1.4±0.2)×107cfu g-1之間。 從刺參養(yǎng)殖池塘水體中分離出7個屬，其中

7、假單胞菌(Pseudomonas)、氣單胞菌(Aeromonas)和弧菌Vibrio)是主要的優(yōu)勢菌；從底泥中分離出16個屬，其中優(yōu)勢菌是芽孢桿菌(Bacillus)，其次是黃桿菌(Flavobacterium)和黃單胞菌(Xanthomonas)。 刺參腸道內(nèi)總活菌數(shù)量隨季節(jié)的變化與水體和底泥有所不同，而與附著基上總活菌數(shù)的變化趨勢相似。刺參腸道內(nèi)總活菌數(shù)在春夏兩季(3、5、6和7月份)較低，秋冬兩季(8、10、11和1月份)

8、則顯著升高。刺參腸道內(nèi)總活菌數(shù)變化在(5.9±0.58)×104～(2.9±1.4)×107cfu·g-1之間。其中，春季變動在(5.9±0.58)×104cfu·g-1～(2.1±0.41)×105 cfu·g-1之間；夏季變動在(5.2±3.5)×104～(2.6±1.4)×105cfu·g-1之間；秋季變動在(2.0±2.0)×107～(2.9±1.4)×107 cfu·g-1之間變化；冬季變動在(9.2±2.1)×106～(2.

9、6±0.8)×107 cfu·g-1之間。 從2007年6月到2008年5月，對青島市膠南投餌刺參養(yǎng)殖池塘內(nèi)環(huán)境中和刺參腸道內(nèi)的異養(yǎng)菌總活菌數(shù)周年變化進(jìn)行了調(diào)查，并分析了其區(qū)系組成。研究結(jié)果表明，在投餌池塘中水中總活菌數(shù)在夏季(6月至7月)數(shù)量最高，秋季數(shù)量開始下降，到冬季有所回升在11月份達(dá)到第二個高峰。水體中總活菌數(shù)的數(shù)量春季變動在(2.0±0.3)×105～(2.2±0.2)×105 cfu mL-1之間；夏季變動在(1.

10、0±0.3)×105～(7.1±2.5)×105cfu mL-1之間；秋季變動在(3.2±0.8)×105～(1.1±0.1)×106cfumL-1之間；冬季變動在(2.9±1.3)×105～(3.0±0.7)×105cfu mL-1之間。底泥中總活菌數(shù)在夏季(8月)最高，之后開始下降，在冬季和春季保持在較低的水平。底泥中總活菌數(shù)的數(shù)量變動春季變動在(2.0±0.3)×105cfu g-1～(2.2±0.2)×105 cfug-1之間；

11、夏季變動在(1.0±0.3)×105 cfu g-1～(7.1±2.5)×105cfu g-1之間；秋季變動在(3.2±0.8)×105～(1.1±0.1)×106cfu g-1之間；冬季變動在(2.9±1.3)×105～(3.0±0.7)×105cfu g-1之間。 刺參腸道內(nèi)活菌的數(shù)量隨季節(jié)變化有所不同，在春夏季(3、5、6和7月份)較低，秋冬季(8、10、11和1月份)則顯著升高。腸道內(nèi)異養(yǎng)菌總活菌數(shù)變動在(1.8±0.8

12、)×104～(1.1±1.2)×107cfu·g-1之間。其中，春季變動在(2.31±0.43)×105cfu·g-1～(2.53±0.84)×105 cfu·g-1之間；夏季變動在(1.8±0.8)×104～(5.0±0.63)×105 cfu·g-1之間；秋季變動在(1.0±0.1)×106～(1.1±1.2)×107 cfu·g-1之間；冬季變動在(7.0±2.2)×105-(7.2±4.5)×106cfu·g-1之間。利用生理生

13、化方法和16srDNA測序?qū)Ψ蛛x到的138株細(xì)菌進(jìn)行了鑒定，結(jié)果表明這些細(xì)菌分別屬于13個屬，優(yōu)勢菌分別為弧菌(Vibrio)、假單胞菌(Pseudomonas)和芽孢桿菌(Bacillus)。其中，弧菌占39.2％，假單胞菌占15.9％，芽孢桿菌占13.2％?；【谇铩⒍瑑杉据^少出現(xiàn)，所占比例從春、夏兩季的35％～62％減少到秋、冬兩季的25％～28％。而假單胞菌在春、夏、秋三季占總株數(shù)的比例都不超過14％，但在冬季上升到38％。

14、 3不同類型附著基對剌參養(yǎng)殖池塘環(huán)境及刺參腸道中異養(yǎng)菌數(shù)量變動及組成影響的研究 從2007年6月到2008年5月，利用池塘網(wǎng)圍研究了不同類型附著基對池塘環(huán)境中異養(yǎng)菌總活菌數(shù)周年變化進(jìn)行了調(diào)查，并分析了其區(qū)系組成。結(jié)果表明，水體中異養(yǎng)菌總活菌數(shù)在6-10月份之間較高，之后開始迅速下降，冬季(11和1月份)一直維持很低的數(shù)量，到春季(3-4月份)其數(shù)量再次回升。水體中總活菌數(shù)春季在(0.4±0.1)×104～(0.5±0.1)×

15、104 cfu mL-1之間變化，夏季在(0.2±0.01)×104～(0.8±0.1)×104 cfu mL-1之間變化，秋季在(0.9±0.1)×104～(1.8±0.2)×104 cfu mL-1之間變化，冬季在(0.1±0.1)×104～(0.3±0.1)×104 cfu mL-1之間變化。不同網(wǎng)圍底泥中的總活菌數(shù)變化趨勢總體和水體中總活菌數(shù)的變化趨勢類似。不同類型附著基對網(wǎng)圍內(nèi)底泥總活菌數(shù)影響較大?？傮w而言，以瓦片和塑料管為附

16、著基的網(wǎng)圍底泥中的細(xì)菌總數(shù)較高，其中，以瓦片作附著基的網(wǎng)圍內(nèi)底泥細(xì)菌總數(shù)顯著高于其它網(wǎng)圍。不同類型附著基上細(xì)菌數(shù)量的變化隨時間不同有所差異，在附著基剛放入水體不久時，附著基上細(xì)菌數(shù)量相對較少，而當(dāng)年10和11月份附著基上數(shù)量則達(dá)到最大，到次年1月份以后，其數(shù)量又有所下降，直到春季開始再次回升。 刺參腸道內(nèi)總活菌數(shù)隨季節(jié)的變化有所不同，不同附著基網(wǎng)圍刺參都呈現(xiàn)出相似趨勢。總活菌數(shù)在春季和秋季較高，夏季和冬季刺參腸道中的總活菌數(shù)顯著

17、低于其它季節(jié)。在總活菌數(shù)較高的季節(jié)(8月至11月，3月到5月)，石塊附著基網(wǎng)圍中刺參腸道內(nèi)細(xì)菌的數(shù)量要少于其它網(wǎng)圍中的刺參，而塑料管、空心磚和水泥管附著基網(wǎng)圍中的刺參腸道內(nèi)細(xì)菌數(shù)量較高。利用16srDNA測序和生理生化技術(shù)對從刺參腸道中分離得到的細(xì)菌進(jìn)行了鑒定。從總體上看，刺參腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌是假單胞菌、弧菌和芽孢桿菌，其中，弧菌和假單胞菌在春季和夏季所占比例較高，芽孢桿菌比例在秋季至冬季顯著上升。但在秋季和冬季，這三種優(yōu)勢菌的總數(shù)所占比