蜂膠揮發(fā)油提取與抑蜜蜂球囊菌的研究.pdf

1、本文主要對河南蜂膠揮發(fā)油的提取、成分鑒定及理化性質(zhì)、清除DPPH自由基能力、抑蜜蜂球囊菌活性進行了研究,結(jié)果如下:
　　 (1)采用有機溶劑浸提法提取蜂膠揮發(fā)油,比較了石油醚、正己烷、乙醚、四氯化碳四種溶劑的提取率,確定石油醚為最佳溶劑。采用正交試驗優(yōu)化微波-超聲波輔助技術(shù)提取蜂膠揮發(fā)油的工藝,其最佳工藝條件為:料液比1:20,浸提溫度40℃,微波爐選擇中檔功率,提取時間15 min。該條件下的提取率高達(dá)12.32％,說明微波-

2、超聲波協(xié)同輔助這種新技術(shù)具有很強的可行性。
　　 (2)采用GC-MS技術(shù)對石油醚、正己烷、乙醚、四氯化碳四種溶劑浸提物(分別為PEP、HEP、TEP、DEP)的成分進行鑒定分析。其中PEP鑒定出60種化合物,HEP49種化合物,TEP46種化合物,DEP47種化合物,其相對百分含量分別為34.18％,30.03％,47.66％,35.14％。主要成分有烷烴、烯、醇、酸、醛、酮、酯類等化合物,但各成分在含量上存在很大的差異,表明

3、溶劑的極性會影響其對蜂膠揮發(fā)性成分的選擇性。
　　 (3)參考GB/T14454,GB/T14455等國家標(biāo)準(zhǔn)對蜂膠揮發(fā)油PEP的9項理化指標(biāo)進行了初步的檢測,結(jié)果顯示:PEP為黃色透明油狀液體,有濃郁香味;在25℃時,PEP的相對密度為0.936;折光率為1.43505;熔程為25℃～47℃;凝點為24℃;PEP在乙醇中的溶混度表示為1 mL的PEP能完全溶解于17.6 mL的90％乙醇溶液中;PEP的酸值與酯值分別為14.8

4、和16.7;羰基化合物含量和含酚量分別為11.8％,60.4％。
　　 (4)以DPPH自由基清除能力評價了TEP、PEP、HEP及DEP的抗氧化活性。Duncan多重比較分析結(jié)果顯示:TEP、PEP、HEP及DEP之間的抗氧化活性差異極顯著(P＜0.01),抗氧化活由強到弱的順序為TEP＞PEP＞HEP＞DEP;TEP和蜂膠的抗氧化活性在5％水平上差異不顯著,但均表現(xiàn)出很強的清除DPPtH自由基能力。TEP、PEP、HEP及D

5、EP的抗氧化活性都呈現(xiàn)量效關(guān)系,即DPPH自由基清除率隨著濃度增大而升高;清除自由基的IC50分別約為5μg/mL,10μg/mL,50μg/mL,200μg/mL。TEP具有很強抗氧化活性與其含大量的高良姜素、松屬素等黃酮類物質(zhì)有關(guān);而DEP的抗氧化活性很弱可能與DEP中含有具有抗氧化活性的酯類和酚類物質(zhì)非常少有關(guān)。
　　 (5)采用生長速率法和試管連續(xù)稀釋法分析蜂膠與蜂膠揮發(fā)油PEP抑蜜蜂球囊菌活性,并與制霉菌素的抑菌效果作