遼寧葡萄炭疽病菌對(duì)多菌靈抗藥性研究.pdf

1、葡萄炭疽病是遼寧省葡萄生產(chǎn)上的重要病害之一，已對(duì)多菌靈產(chǎn)生抗性。本文在廣泛凋查和病原采集的基礎(chǔ)上，應(yīng)用了傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)相結(jié)合的方法進(jìn)行病原鑒定；建立了葡萄炭疽病菌對(duì)多菌靈的敏感基線并測(cè)定其敏感性，評(píng)估了該病菌對(duì)多菌靈的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)；進(jìn)行了室內(nèi)藥劑的篩選，從而為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上提高藥效，減少損失，病害防治上提供理論依據(jù)。獲得研究結(jié)果如下： 1、經(jīng)對(duì)遼寧省主要葡萄產(chǎn)區(qū)24個(gè)葡萄炭疽菌株致病性測(cè)定、病原菌形態(tài)鑒定和進(jìn)一步用rRNA-

2、ITS區(qū)段進(jìn)行序列分析的分子鑒定后，結(jié)果表明：引起遼寧省不同地區(qū)葡萄炭疽病的病原鑒定為半知菌亞門(mén)中炭疽菌屬的膠孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides（Penz．）Sacc．）。并用檢測(cè)出來(lái)的ITS序列與GenBank中的核酸數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)。結(jié)果顯示該菌與已發(fā)表的膠孢炭疽菌同源性相似度很高，達(dá)到99%以上。這與生物學(xué)鑒定的結(jié)果一致。 2、建立了葡萄炭疽菌對(duì)多菌靈的敏感基線，采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定了這24種

3、葡萄炭疽菌株對(duì)多菌靈的敏感性，結(jié)果表明：該病菌對(duì)多菌靈的敏感性測(cè)定值EC50的范圍是0．2678μg/mL～2．7312μg/mL，平均值1．14492μg/mL。大部分菌株的抗藥性表現(xiàn)為中抗水平（EC50為0．4598μg/mL～2．299μg/mL），僅有一個(gè)菌株抗性較高（EC50為2．7312μg/mL），而不同敏感性頻率分布呈不規(guī)則的正態(tài)分布，存在敏感性下降的風(fēng)險(xiǎn)。 3、對(duì)葡萄炭疽菌在室內(nèi)進(jìn)行了多菌靈風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。試驗(yàn)結(jié)果表

4、明：采用紫外誘導(dǎo)與藥劑馴化的方法獲得三株抗藥性突變體，抗藥水平分別是6431．96倍、46．76倍和11．72倍。紫外誘導(dǎo)的兩個(gè)突變菌株與自然抗藥菌株經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)后的穩(wěn)定性較高，而藥劑馴化菌株經(jīng)繼代培養(yǎng)后的穩(wěn)定性下降的幅度較大。在致病力比較當(dāng)中，各誘導(dǎo)菌株沒(méi)有親本菌株和自然抗藥菌株致病力強(qiáng)。在測(cè)定各菌株菌絲生長(zhǎng)速率、產(chǎn)孢量與孢子萌發(fā)率等適合度方面，SJX-U2、SJX-Y1、FML菌株比敏感菌株SJX有良好的適合度，而SJX-U1的適合

5、度較弱。親本菌株室內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)力優(yōu)于各抗藥性突變體，在混合條件下有一定的競(jìng)爭(zhēng)力。菌株SJX和FML對(duì)各藥劑均無(wú)交互抗性，而誘導(dǎo)菌株SJX-U2和SJX-Y1對(duì)退菌特沒(méi)有交互抗性，而對(duì)福美雙、百菌清、甲基托布津藥劑存在正交互抗性。 4、對(duì)SJX、FML、SJX-Y1這三種菌株進(jìn)行室內(nèi)藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明：70%甲基托布津WP、50%退菌特WP、50%多菌靈WP、50%咪鮮胺WP四種殺菌劑的藥效抑制率相對(duì)較好?？紤]價(jià)格、毒素、藥效等方面，進(jìn)