濰坊地區(qū)鴨傳染性漿膜炎病原體的分離鑒定與疫苗制備應(yīng)用研究.pdf

1、鴨傳染性漿膜炎是由鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer，RA）引起的一種接觸性、急性或慢性、敗血性傳染病，曾被命名為鴨疫巴氏桿菌?。≒asteurella anatipestifer infection），。主要感染1-8周齡雛鴨，其中以2-3周齡鴨最易感，死亡率差別較大，是當(dāng)前危害養(yǎng)鴨業(yè)的重要傳染病之一。為了探明濰坊地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的主要生物學(xué)特性及防制方法，開(kāi)展了本項(xiàng)研究，分三部分研究?jī)?nèi)容。
　　

2、 試驗(yàn)一鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定
　　 從濰坊地區(qū)發(fā)生的典型鴨傳染性漿膜炎病料中分離到了4株革蘭陰性小桿菌，經(jīng)過(guò)生化試驗(yàn)、PCR等方法鑒定為鴨疫里默氏桿菌（RA），將其分別命名為SGl、HT2、WC3、SG4。然后對(duì)4株菌的致病性、藥物敏感性及血清型進(jìn)行了進(jìn)一步鑒定，結(jié)果顯示，4株菌對(duì)雛鴨都有很強(qiáng)的致病性；多數(shù)菌株對(duì)慶大霉素、氯霉素、環(huán)丙沙星、呋喃妥因、菌必治、頭孢噻肟有較高的敏感性；WC3株為血清1型，SG1、HT2、SG4

3、為血清3型。
　　 試驗(yàn)二鴨疫里氏桿菌對(duì)雛鴨致病性研究
　　 采用WC3株RA制備成含菌量約為3×109CFU/ml的菌懸液，對(duì)10日齡雛鴨腳蹼注射接種病原菌，通過(guò)觀察臨床癥狀和病理變化、檢測(cè)感染鴨免疫器官和組織學(xué)等變化，探索鴨疫里氏桿菌對(duì)鴨的致病性，結(jié)果顯示：感染鴨出現(xiàn)與自然發(fā)病鴨相似的臨床癥狀，剖檢觀察無(wú)典型病變，有的氣囊略渾濁，輕度心包積液，腦血管擴(kuò)張呈樹(shù)枝狀，但因病程較短各臟器均無(wú)明顯的纖維素性滲出。各組鴨免疫器

4、官的變化明顯，感染鴨的脾臟（1、2組每只平均重分別為1.1g、1.2g）略有腫脹（對(duì)照組平均重1.0g），并呈斑駁狀；胸腺腫大明顯（1、2組每只平均重分別為1.2g、1.3g，對(duì)照組0.98g），并有出血；法氏囊呈現(xiàn)明顯的萎縮現(xiàn)象（1、2試驗(yàn)組每只平均重分別為0.8g、0.75g，對(duì)照組為1.1g）。
　　 脾臟和法氏囊的病理組織學(xué)損傷嚴(yán)重，淋巴細(xì)胞均明顯減少；胸腺病理組織學(xué)變化不顯著。
　　 試驗(yàn)三鴨疫里默氏桿菌滅活苗

5、的研制及其免疫效果研究
　　 取WC3（1型）、SG4株（3型）RA株分別培養(yǎng)，經(jīng)純檢合格（≥109/ml）甲醛滅活，加2％吐溫-80制成水相后，與94％的白油、6％的司本80、2％硬脂酸鋁混合制成油相，然后按1:2的比例分別制成油乳劑滅活單苗，并進(jìn)行疫苗的無(wú)菌檢驗(yàn)、安全性檢驗(yàn)、穩(wěn)定性檢驗(yàn)、免疫保護(hù)試驗(yàn)。結(jié)果顯示：兩種油乳劑滅活苗在TSA平板、血平板上均無(wú)細(xì)菌、霉菌生長(zhǎng)；在3000 r/min離心15min，未發(fā)生分層現(xiàn)象；按5