山羊傳染性胸膜肺炎病原的分離鑒定.pdf

1、本研究從四川地區(qū)某羊場具有傳染性胸膜肺炎臨床癥狀的患病山羊的肺臟、氣管等材料中成功地分離和鑒定了兩株霉形體(分別命名為Y1和Y2)。主要通過病原分離培養(yǎng)特性、形態(tài)學觀察、生化試驗、間接血凝試驗、生長抑制試驗和代謝抑制試驗、動物回歸試驗等方法進行鑒定。 鑒定結(jié)果如下：分離株Y1和Y2都能通過0.45μm的微孔濾器，進行過濾傳代培養(yǎng)。在形態(tài)學觀察中，都具有革蘭氏染色不易著色，瑞氏染色良好呈淡紫色；在透射電鏡下觀察，Y1和Y2的菌體呈

2、球狀、絲狀、桿狀、螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)，大小為0.2～0.4μm。在含1％營養(yǎng)瓊脂的固體培養(yǎng)基上均形成圓形、露滴狀的小菌落；在40倍和100倍光學顯微鏡下觀察時，可看見典型的煎蛋樣菌落，但其形態(tài)不完全相同。Y1的菌落形態(tài)較小，菌落生長比較密集，融合菌落較多，中心臍向上突起；Y2的菌落形態(tài)較大，菌落較分散，無中心臍。在生化試驗中，Y1和Y2均能夠發(fā)酵葡萄糖、還原美藍、液化血清；均不水解尿素、不水解精氨酸、膜斑形成試驗呈陰性、磷酸酯酶活性呈陰

3、性。在間接血凝試驗中，提純的Y1和Y2抗原均能與PG3和Y98標準陽性血清發(fā)生凝集反應，均不與PG3和Y98的標準陰性血清發(fā)生凝集反應。在生長抑制試驗中，PG3和Y98標準陽性血清均能抑制Y1和Y2生長，并形成大于2mm的抑制圈；PG3和Y98的標準陰性血清均不能抑制Y1和Y2生長，不形成明顯的抑制圈。在代謝抑制試驗中，加入的標準陽性血清濃度較高時(如1∶23、1∶24)，均能抑制Y1和Y2的生長；當加入的標準陽性血清濃度適中時(如1∶

4、25、1∶26、1∶27)，PG3的標準陽性血清能在一定程度上抑制Y1的生長，Y98的標準陽性血清能在一定程度上抑制Y2的生長；當加入的標準陽性血清濃度較低時(如1∶28、1∶29)，均不抑制Y1和Y2的生長。在動物回歸試驗中，均能成功復制出山羊傳染性胸膜肺炎的典型臨床癥狀和病理解剖變化。 試驗表明，Y1和Y2的形態(tài)與培養(yǎng)特性、生化反應特性和血清學特性分別與模式株絲狀霉形體山羊亞種PG3和綿羊肺炎霉形體Y98相接近；結(jié)果證實Y1