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1、項(xiàng)目名稱(chēng):人類(lèi)重要病原體致病機(jī)制研究人類(lèi)重要病原體致病機(jī)制研究首席科學(xué)家:金奇金奇中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所防控制所起止年限:依托部門(mén):衛(wèi)生部衛(wèi)生部(4)分離、鑒定與HBx蛋白相互作用的新細(xì)胞蛋白(5)與HBx相互作用蛋白因子的表達(dá)差異研究(6)超表達(dá)HBx蛋白及其相互作用細(xì)胞蛋白對(duì)細(xì)胞生理功能的和HBV病毒的影響(7)抑制與HBx蛋白相互作用蛋白表達(dá)后對(duì)細(xì)胞生理活性和HBV病毒的影響(8)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)
2、物水平HBx蛋白及其相互作用蛋白的功能性研究利用BactoBac桿狀病毒真核表達(dá)系統(tǒng),構(gòu)建含有完整HBV基因組的重組桿狀病毒。利用該重組病毒感染不同肝細(xì)胞,選擇一個(gè)或幾個(gè)合適的細(xì)胞系作為研究HBV的分子生物學(xué)和藥物的篩選的平臺(tái)。利用桿狀病毒能轉(zhuǎn)導(dǎo)不同的肝細(xì)胞的特性,利用Microarray分析重組HBV感染前后細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄譜,結(jié)合差減文庫(kù)來(lái)篩選與HBV感染相關(guān)的基因。采用蛋白質(zhì)二維電泳、質(zhì)譜,結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)和噬菌體展示文庫(kù),最新的組織表達(dá)
3、蛋白或者DNA芯片等現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)分離并鑒定HBV感染相關(guān)的受體和輔助受體。采用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選和差異表達(dá)文庫(kù)分析等方法,尋找與HBx蛋白相互作用的細(xì)胞蛋白,研究HBx蛋白與其相互作用細(xì)胞蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、增殖等生物學(xué)功能。在細(xì)胞和組織水平上分析HBx蛋白相互作用細(xì)胞因子的表達(dá)差異,研究新的相互作用細(xì)胞因子的生物學(xué)功能。HBx蛋白與激活的ras、Myc等腫瘤因子相互作用對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及試驗(yàn)動(dòng)物致瘤性的影響,并借助現(xiàn)代分子生物學(xué)、
4、細(xì)胞生物學(xué)、分子病毒學(xué)技術(shù)闡明HBx蛋白及其相互作用的細(xì)胞蛋白對(duì)細(xì)胞凋亡、生長(zhǎng)特性等的影響作用途徑,深入探討HBV致病和致癌的分子機(jī)制。3研究抗原特異性免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞在病毒性肝炎發(fā)病與轉(zhuǎn)歸中的作用及其網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制(1)中國(guó)旱獺嗜肝病毒急、慢性感染模型的建立(2)中國(guó)旱獺嗜肝病毒模型在HBV感染相關(guān)疾病研究中的實(shí)際應(yīng)用(3)利用小鼠模型研究特異性Tr細(xì)胞包括DNTr在調(diào)節(jié)機(jī)體產(chǎn)生適度的免疫反應(yīng)以清除肝炎病毒、抵抗感染中的作用和作用機(jī)制(4
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