鳳仙花壞死斑病毒傳毒特性研究.pdf

1、鳳仙花壞死斑病毒(Impaliens necrotic spot virus,INSV)是一種能夠引起多種農(nóng)業(yè)和園藝觀賞作物嚴(yán)重病害的植物病毒，該病毒主要依靠薊馬傳播，其中西花薊馬是最重要的傳播介體。本研究將采自昆明非洲菊大棚的西花薊馬，經(jīng)生物學(xué)鑒定和飼養(yǎng)，將飼養(yǎng)4-5代的一齡若蟲接種到采自呈貢蝴蝶蘭上的INSV陽性樣本獲毒，并將獲毒的一齡若蟲培養(yǎng)成成蟲，轉(zhuǎn)接到健康的黃花煙上傳毒，來模擬自然界西花薊馬的傳毒過程。利用RT-PCR技術(shù)，D

2、AS-ELISA技術(shù)對西花薊馬的獲毒率、傳毒率以及獲毒時(shí)間閾值進(jìn)行了測定，并結(jié)合優(yōu)化的已構(gòu)建的檢測INSV TaqMan實(shí)時(shí)熒光定量PCR對西花薊馬體內(nèi)INSV的增殖規(guī)律進(jìn)行測定；并利用聚集度指標(biāo)、Iwao和Taylor回歸方程對西花薊馬在花卉和蔬菜上的空間分布圖式和種群動(dòng)態(tài)進(jìn)行調(diào)查。結(jié)果顯示：西花薊馬一齡若蟲獲毒24h的平均獲毒率為93.3％，成蟲平均傳毒率為80％，最小獲毒時(shí)間為30min，傳毒率隨獲毒時(shí)間的增加而增加，且核殼體蛋白

3、（nucleocapsid protein，NP）的量也有所增加，當(dāng)獲毒48h，傳毒率達(dá)到100％；通過TaqMan實(shí)時(shí)PCR檢測顯示一齡若蟲每5頭體內(nèi)的INSV病毒在100拷貝/μl,隨著薊馬的發(fā)育，INSV在西花薊馬體內(nèi)呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)增，到成蟲濃度達(dá)最大，當(dāng)成蟲體內(nèi)濃度增加到102拷貝/μl開始傳播病毒，但成蟲體內(nèi)的INSV病毒不傳給子代；西花薊馬已經(jīng)成為昆明部分花卉和蔬菜作物上的薊馬優(yōu)勢種群，且空間分布型為聚集分布。通過對西花薊馬傳播