三疣梭子蟹不同地理群體遺傳多樣性和雜交育種的初步研究.pdf

1、本文利用生物學性狀多元分析和線粒體DNA基因片段序列分析技術(shù)對分別采自海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)4個群體的遺傳多樣性進行了比較分析，同時對三疣梭子蟹群體內(nèi)自繁和種群間雜交子代的生長性狀進行了研究，主要結(jié)果如下： 對三疣梭子蟹4個野生群體線粒體16S rRNA和COI基因片段進行了PCR擴增和產(chǎn)物測序，分別得到長度為524bp和658bp的片段。兩段序列的堿基組成均

2、顯示較高的A+T比例(16S rRNA基因70.8％，COI基因63％)，這與果蠅、蝦類、蟹類等無脊椎動物的16S rRNA和CO I基因片段研究結(jié)果相似。通過對三疣梭子蟹16S rRNA和CO I基因片段遺傳特征的研究，發(fā)現(xiàn)種內(nèi)地理群體間變異較低，在16個樣本中，16S rRNA基因序列中共檢測到1個變異位點，2種單倍型；CO I基因序列中共檢測到4個變異位點，5種單倍型。另外，以中華絨螯蟹為外群探討了梭子蟹科(Portunidea)

3、幾個屬種的系統(tǒng)進化關(guān)系。用MEGA4.0軟件中的NJ法構(gòu)建了系統(tǒng)進化樹，基于16S rRNA和CO I兩種片段的聚類結(jié)果均顯示梭子蟹屬(Portunus)與美青蟹屬(Callinectes)親緣關(guān)系最近，先聚在一起，然后再與蟳屬(Charybdis)聚在一起，最后才與外群中華絨螯蟹聚在一起，這一結(jié)果與傳統(tǒng)分類基本一致。 采用不同地理群體內(nèi)自繁和種群間雜交的方法，進行了自繁和雜交子一代生長性狀的比較研究。結(jié)果表明，80日齡時的雜交

4、子一代在各項指標都表現(xiàn)出一定的雜種優(yōu)勢(0.24％～13.50％)，LS在5個性狀中都高于ZL。100日齡時雜交子一代表現(xiàn)出的雜種優(yōu)勢有所下降，雜種優(yōu)勢率在-0.88％～4.13％之間，甲長表現(xiàn)出雜種劣勢。120日齡時雜交子一代的雜種優(yōu)勢范圍為-1.91％～4.37％，甲長、甲寬表現(xiàn)出雜種劣勢?？梢姴煌s交組合、不同性狀、不同時間表現(xiàn)出的雜種優(yōu)勢有顯著差異。ANOVA分析表明，80日齡、100日齡、120日齡時，5個生長性狀在群體之間存

5、在極顯著差異。實驗結(jié)果表明，三疣梭子蟹4個雜交子一代在生長性狀上存在一定程度的雜種優(yōu)勢，可見種內(nèi)群體間雜交是培育三疣梭子蟹優(yōu)良新品系的重要方法之一。 另外，測量了海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山4個選育二代群體100日齡三疣梭子蟹的5個外部形態(tài)性狀，用SPSS11.0統(tǒng)計軟件對這4個群體進行了聚類分析、判別分析和單因子方差分析。聚類分析結(jié)果表明，海州灣和舟山2個群體形態(tài)最為接近，遼東灣和萊州灣2個群體形態(tài)較為接近。對樣本所屬群體進行

6、判別分析，海州灣、萊州灣、遼東灣、舟山4個群體的判別準確率分別為80％、76.7％、80％和42.9％，綜合判別率為70.3％；建立了4個群體各自的判別函數(shù)公式。通過對4項形態(tài)比例參數(shù)進行單因素方差分析，計算差異系數(shù)，發(fā)現(xiàn)4個參數(shù)在群體間存在極顯著差異。3種分析結(jié)果均認為，4個群體三疣梭子蟹在形態(tài)上產(chǎn)生了一定程度的差異，但所有的差異均未達到亞種水平。 本研究以期為三疣梭子蟹親緣關(guān)系的比較、種質(zhì)資源保護和良種的培育提供依據(jù)，從而促