三疣梭子蟹自交家系性狀的遺傳穩(wěn)定性研究.pdf

1、本研究以三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）自交9代家系為實驗材料，采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）、最小顯著差法（LSD）多重比較分析，對三疣梭子蟹連續(xù)多代自交家系的繁殖性能和生長性能進行了比較分析，評估自交對人工養(yǎng)殖的三疣梭子蟹的繁殖、生長、存活及與存活相關(guān)的產(chǎn)量等若干生長性狀方面是否有影響，以及自交家系間免疫及抗氧化能力等抗病相關(guān)能力的影響。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴通過人工定向交

2、尾的方式建立三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）連續(xù)1~9代家系內(nèi)自交全同胞家系為材料評價連續(xù)多代自交幼體發(fā)育和形態(tài)性狀的影響。實驗結(jié)果表明，在幼體發(fā)育方面，F(xiàn)1~F9各家系之間的排幼量并不呈線性關(guān)系，也無明顯上升或下降的趨勢，但在幼體變態(tài)率的測定中發(fā)現(xiàn)，在溞狀幼體和大眼幼體2個階段中總體呈現(xiàn)衰退趨勢，尤其自交家系程度高的F9代變態(tài)率最低，F(xiàn)9代Z1-Z2變態(tài)率為74.87％±13.18%， Z2-Z3變態(tài)率為

3、73.50%±14.77%，Z3-Z4變態(tài)率為59.17%±13.58%，Z4-M變態(tài)率為41.96%±18.74%；在形態(tài)學(xué)方面，在80日齡時，F(xiàn)1~F9家系的各個形態(tài)學(xué)指標(biāo)差異不大（P>0.05），但隨著生長日齡的增加，隨著自交代數(shù)的增加，F(xiàn)3~F9代各項指標(biāo)均低于F1、F2代家系，其中F9各項指標(biāo)皆是最小且與其他各代差異顯著（P<0.05），但在150日齡時對梭子蟹整齊度的研究中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)9的全甲寬變異系數(shù)為7.5444，甲寬變異系

4、數(shù)7.6365，甲長變異系數(shù)7.5591，體高變異系數(shù)8.3282，體質(zhì)量變異系數(shù)22.6644，其中甲寬、甲長、體高變異系數(shù)在所有家系中最小，整齊度最好。9代家系所有實驗結(jié)果均指明自交對三疣梭子蟹的幼體變態(tài)、個體形態(tài)大小以及梭子蟹150日齡時個體的生長特性產(chǎn)生的影響程度不同，造成一定程度的衰退，除了F2代家系以外，隨著自交系數(shù)的增加，相對于F1代，全甲寬出現(xiàn)-6.12%~-21.95%的衰退，甲寬出現(xiàn)-1.85%~-16.36%的衰退

5、，甲長發(fā)生-10.08%~-27.66%的衰退，體高發(fā)生-9.39%~-22.7%的衰退，而體質(zhì)量和排幼量的衰退系數(shù)相較于其他幾個性狀衰退較高，體質(zhì)量的衰退系數(shù)為-13.39%~-47.99%，排幼量的衰退系數(shù)為-9.03%~-45.13%。實驗結(jié)果將為三疣梭子蟹的繁育工作中提供數(shù)據(jù)支持。⑵研究了不同體質(zhì)量三疣梭子蟹在進行人工侵染后的免疫相關(guān)指標(biāo)以及抗氧化參數(shù)的變化。結(jié)果顯示大個體梭子蟹的總血細(xì)胞數(shù)量（THC）、噬菌率、酚氧化酶原以及酚

6、氧化酶在侵染溶藻弧菌72h之后皆比小個體的三疣梭子蟹水平高?？寡趸瘏?shù)皆呈現(xiàn)出類似的趨勢：無論血淋巴還是肝胰腺中總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物岐化酶活力（SOD）以及還原型、氧化型谷胱甘肽（GSH/GSSG）都與體質(zhì)量密切相關(guān)（P<0.05）。血淋巴中的α2-巨球蛋白、抗菌和溶菌活力，以及血淋巴和肝胰腺中的谷胱甘肽過氧化物酶活力之間的差異都不明顯。血細(xì)胞的酚氧化酶原和crustin基因表達水平，以及血細(xì)胞與肝胰腺中的 SOD基因表

7、達量都呈隨著體重增加而上升的水平。結(jié)果表明，相比小個體三疣梭子蟹來說，大個體梭子蟹對溶藻弧菌有更高的抵抗能力來防御弧菌的侵染。⑶研究了不同程度的自交對三疣梭子蟹家系生長過程中的免疫及抗氧化能力的影響。結(jié)果表明，自交九代之后，引起了梭子蟹總血細(xì)胞數(shù)量、噬菌活力、酚氧化酶原、酚氧化酶以及抗菌活力的的下降。相關(guān)抗氧化指標(biāo)顯示：血淋巴和肝胰腺的總抗氧化能力（ T-AOC）、超氧化物岐化酶活力（ SOD）以及還原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽（GSH

8、/GSSG）呈下降趨勢，而游離在血淋巴中的過氧化氫酶活力（CAT）呈上升趨勢（P<0.05）。在九代自交家系血淋巴中的α2-巨球蛋白和溶菌活力，以及血淋巴和肝胰腺中的谷胱甘肽過氧化物酶活力都沒有明顯的差異。血細(xì)胞的酚氧化酶原（proPO）、crustin，與血細(xì)胞及肝胰腺中的超氧化物岐化酶的基因表達水平都呈隨著自交代數(shù)的增加而明顯下降。本實驗結(jié)果說明，高水平的自交會嚴(yán)重影響三疣梭子蟹生理健康的各項指標(biāo)。實驗結(jié)果將為三疣梭子蟹的繁育工作中