青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)致病力分化的研究.pdf

1、通過對青枯病不同發(fā)病時期不同部位的番茄、花生和生姜植株的青枯雷爾氏菌進行分離,從番茄青枯病發(fā)病初期的病株根部和青枯病發(fā)病后期的病株莖中部分離到的青枯菌中除了強致病力的菌株外,還分離到少量無致病力的菌株,從生姜病株的莖上分離到的青枯菌均為無致病力的菌株。
　　 通過生防菌BC-0711和青枯雷爾氏菌1:1共培養(yǎng)試驗,表明生防菌BC-0711對供試青枯雷爾氏菌均有抑制作用,但是對不同菌株的抑制率有所差異,生防菌對Rs466菌株的抑制

2、率僅為4.6％,對Rs91和Rs1447的抑制率較高,分別達到78.3％和79.9％,對其他菌株的抑制率為43.5％-59.6％。對強致病力青枯雷爾氏菌Rs91和Rs1100連續(xù)5代的繼代培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)Rs91未出現(xiàn)致病力分化,而Rs1100在第五代時出現(xiàn)致病力分化。生防菌BC-0711對Rs91連續(xù)處理3代后,未出現(xiàn)致病力分化,對Rs1100第一次處理后即出現(xiàn)無致病力菌株的分化。
　　 通過Tn5轉(zhuǎn)座子隨機插入青枯雷爾氏菌(Rs9

3、1)獲得1004株轉(zhuǎn)座子隨機插入突變株,經(jīng)過在TTC平板上的形態(tài)特征篩選,其中有13株突變株具有無致病力青枯雷爾氏菌的形態(tài)特征。對其中5株無致病力突變株進行反向PCR測序和序列比對,分析鑒定出這5株青枯雷爾氏菌突變株的插入位點在phcA基因和phcS基因上,經(jīng)番茄盆栽苗致病力檢測,確定為無致病力菌株。比較了這5株突變株與原始菌株的生理生化特性,這5株突變株的生長速率和相對胞外多糖含量顯著低于Rs91,但最適pH值和最適溫度未發(fā)生變化。5