擬南芥和甘藍(lán)型油菜油體蛋白功能分析.pdf

1、油菜作為世界上大規(guī)模種植的油料作物之一，每年提供人類食用油13％左右。菜籽油是食用油的重要組成部分，目前我國菜籽油產(chǎn)量處于供不應(yīng)求的狀態(tài)，因此，提高含油量和改善油菜品質(zhì)是現(xiàn)代育種的重要組成部分。油體蛋白是鑲嵌在油滴表層的堿性蛋白質(zhì)，對種子內(nèi)油滴形成以及脂質(zhì)積累有著重要的作用。本研究主要通過克隆及超表達(dá)擬南芥和甘藍(lán)型油菜油體蛋白基因分析油體蛋白對種子含油量的影響。主要研究結(jié)果如下：
　　1）從擬南芥和甘藍(lán)型油菜果莢中分別克隆了AtO

2、LE1、AtOLE2、AtOLE3、AtOLE4及 BnOLE1、BnOLE2、BnOLE3、BnOLE4油體蛋白基因，并對油體蛋白基因進(jìn)行了蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)、亞細(xì)胞定位預(yù)測及進(jìn)化樹等生物信息學(xué)分析。
　　2）分別構(gòu)建了油體蛋白基因與pBinGlyRed3質(zhì)粒種子特異性表達(dá)載體，同時構(gòu)建了目的基因與pCambia1303-EGFP-DsRed3重組載體用于亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)，將構(gòu)建成功的重組載體通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化擬南芥，獲得T0代

3、轉(zhuǎn)基因擬南芥種子。
　　3）測定 T1代轉(zhuǎn)基因種子以及 T2代純系種子中含油量以及脂肪酸組分發(fā)現(xiàn)，在擬南芥中超表達(dá)油體蛋白基因?qū)土坑绊懖淮?，但可以促使種子中亞油酸(C18:2)含量提高1.2%-6.2%，二十碳烯酸(C20:1)含量降低1.0%-2.9%，說明油體蛋白基因在擬南芥中超表達(dá)后對種子的脂肪酸組分有一定的調(diào)節(jié)作用。
　　4）對轉(zhuǎn)基因種子的油滴大小、萌發(fā)率等形態(tài)學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示在轉(zhuǎn)基因BnOLE16株系中