CEF感染REV后部分染色體微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的研究.pdf

1、禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病(reticuloendotheliosis，RE)是繼雞馬立克氏病、雞淋巴細(xì)胞白血病之后的第三種病毒性腫瘤病。微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(microsatelliteinstability,MSI)廣泛地應(yīng)用于人類腫瘤病的檢測(cè)。目前未見有應(yīng)用微衛(wèi)星技術(shù)研究禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒(reticuloendotheliosisvirus，REV)感染雞胚成纖維細(xì)胞后引起宿主基因組變化的報(bào)道。本試驗(yàn)將REV感染雞胚成纖維細(xì)胞后，檢測(cè)

2、雞染色體上微衛(wèi)星不穩(wěn)定性，旨在發(fā)現(xiàn)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒感染雞胚成纖維細(xì)胞后是否引起宿主基因組的改變，為此病的早期診斷及腫瘤的分子發(fā)病機(jī)制提供線索。
　　本試驗(yàn)中應(yīng)用22個(gè)SPF雞胚培養(yǎng)雞胚成纖維細(xì)胞，將每個(gè)雞胚的細(xì)胞分成兩部分，一半細(xì)胞接種REV，另一半作為對(duì)照，獲得含試驗(yàn)和對(duì)照的22組樣本，提取細(xì)胞的基因組DNA。選取雞1、2、3號(hào)染色體上135個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記，分別采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、12％變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、銀染等技術(shù)檢

3、測(cè)基因組微衛(wèi)星不穩(wěn)定性。
　　試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示135個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記，有106個(gè)位點(diǎn)發(fā)生不同百分率的MSI，占全部微衛(wèi)星標(biāo)記的78.52％。其中ABR0139變化率為50.00％。變化率在30％以上的位點(diǎn)共有16個(gè)。這16個(gè)位點(diǎn)中位于1號(hào)染色體上的位點(diǎn)有8個(gè)，分別是ABR0139、ABR0172、MCW0036、ABR0504、ABR0528、ABR1328、MCW0167、ABR0368;位于2號(hào)染色體上的位點(diǎn)有7個(gè)，分別是ABR0

4、404、ABR0197、ABR0599、ABR0107、ABR0004、ABR0067、ADL0300;位于3號(hào)染色體上的位點(diǎn)有1個(gè)，分別是ABR0350。另外有29個(gè)標(biāo)記用12％聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法沒有檢測(cè)到變化。
　　22組雞胚成纖維細(xì)胞感染REV后全部表現(xiàn)出MSI。3號(hào)樣品，MSI發(fā)生率最高為40.00％，其次1號(hào)樣品MSI發(fā)生率為25.19％。其余樣品的MSI變化率均在在25％以下。其中，MSI變化率在20-25％的樣