利用番茄相關(guān)細(xì)菌防治番茄青枯病的篩選策略研究.pdf

1、番茄青枯?。╞actexial wilt）是由番茄青枯勞爾氏菌（Ralstonia solanacearum，E FSmith）所引起的一種土傳性維管束病害，分布范圍較廣，在熱帶和亞熱帶地區(qū)常有發(fā)生，造成毀滅性危害，嚴(yán)重影響了番茄的生長(zhǎng)。這種病原菌對(duì)環(huán)境的適應(yīng)性較強(qiáng)，形成了豐富的種下遺傳多樣性，加之該菌的傳播途徑多，寄主范圍廣，并可在土壤中長(zhǎng)期存活，因而造成其防治上的困難。目前在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上采用藥劑防治病害是廣為使用的方法。然而，隨著人們

2、對(duì)綠色農(nóng)業(yè)認(rèn)識(shí)的不斷提高，許多國(guó)家都不同程度地限制了藥劑（特別是化學(xué)農(nóng)藥）的使用范圍和使用種類。在此環(huán)境下，對(duì)青枯病的防治也提出了更高要求，不但要有效地防治青枯病的發(fā)生而且又要符合現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展趨勢(shì)。為確保無(wú)毒、安全、無(wú)公害的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，各國(guó)都將目光集中到了生物防治方面。
　　 1、番茄相關(guān)細(xì)菌的分離及其對(duì)番茄三種病原物的頡頏作用比較
　　 本文從番茄的根圍、葉圍、根內(nèi)、葉內(nèi)和土壤五個(gè)生境中篩選得到了592株細(xì)菌分離物。以

3、番茄的3種病原真菌：終級(jí)腐霉（Pythium ultimum Trow），尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporumf.sp.Vasinfectum（Atk.）Snyder&Hansen），辣椒疫霉（Phytopathora capsici Leonian）作為病原指示菌，篩選獲得了具有頡頏能力的細(xì)菌菌株384株。其中，根圍生境中含有頡頏E oxysporum的細(xì)菌數(shù)目最多，為59株；土壤生境中含有頡頏P.capsici細(xì)菌數(shù)目最

4、多，為36株；五個(gè)生境中含有頡頏P.ultium細(xì)菌數(shù)均比較少。總體來(lái)說(shuō)，五個(gè)生境中，根內(nèi)細(xì)菌的頡頏活性最低，其余四個(gè)生境對(duì)病原菌的頡頏活性沒(méi)有顯著差異。
　　 2、一種基于根圍定殖能力和對(duì)番茄青枯病頡頏細(xì)菌賦值評(píng)估的生防菌株篩選策略研究
　　 本研究前期從番茄的不同生境分離獲得592株細(xì)菌分離物。結(jié)合賦值評(píng)估和定殖力兩者結(jié)合來(lái)篩選具有頡頏番茄青枯病的生防潛力細(xì)菌。根據(jù)平板對(duì)峙法，我們篩選到139株可以頡頏青枯勞爾氏菌的

5、細(xì)菌。研究發(fā)現(xiàn)，葉圍環(huán)境中頡頏細(xì)菌數(shù)目最多。根據(jù)賦值評(píng)估法，我們獲得了23株具有生防潛力的菌株。定殖力測(cè)定結(jié)果表明，接種30天后，Pantoea sp.YT10在番茄根圍的定殖能力最強(qiáng)，定殖量可達(dá)到為106CFU/gRFW。溫室條件下，除菌株YT17外，其它22株頡頏細(xì)菌都不同程度的抑制了番茄青枯病的發(fā)生，防病效果從8.7％到58.2％不等。其中，Pantoea ananatis YT11的防病效果最顯著，為58.2％。溫室防病效果驗(yàn)證

6、了賦值法的可行性。此外，促生實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：20株頡頏細(xì)菌可以促生番茄生物量的增加，其中Pantoea sp.YT10促生效果最為明顯，生物量的增長(zhǎng)率為89.14％。我們發(fā)現(xiàn)，賦值法和溫室防效之間以及定殖力與溫室防效之間都呈一種正相關(guān)線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.837和0.590。上述結(jié)果顯示：基于賦值評(píng)估和定殖力兩者結(jié)合的方法來(lái)篩選頡頏番茄青枯病的方法是有效且可行的。
　　 3、菌株YT15對(duì)五株青枯菌的生防效果比較
　　

7、 以5株分離自番茄的青枯勞爾氏菌作為病原指示菌，檢測(cè)生防菌株YT15對(duì)這5株青枯勞爾氏菌的平板頡頏活性和溫室防治效果。結(jié)果表明：菌株YT15對(duì)不同青枯勞爾氏菌的頡頏活性和溫室防效有顯著差異。平板頡頏實(shí)驗(yàn)中，菌株YT15對(duì)除GZ514以外的四株青枯勞爾氏菌均有頡頏作用，對(duì)JS527的頡頏作用最強(qiáng)，抑菌圈半徑為3.23mm。溫室條件下，菌株YT15對(duì)不同青枯勞爾氏菌引起的番茄青枯病的防治效果為-2.7％至90％不等。此外，我們發(fā)現(xiàn)溫室防治