番茄青枯病拮抗菌的篩選、鑒定和應(yīng)用研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩66頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、番茄青枯病是一類危害嚴(yán)重的世界性土傳細(xì)菌病害,它的有效防治已經(jīng)成為番茄生產(chǎn)中亟待解決的難題。本研究從生物防治的角度出發(fā),分離篩選了對番茄青枯病有拮抗作用的菌株,通過溫室盆栽試驗和田間小區(qū)試驗進(jìn)行了防治效果和田間應(yīng)用效果評價。旨在為高效芽孢桿菌的研制和使用提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。 主要研究內(nèi)容有以下幾個方面: 1.從山東壽光和蒼山不同種植年限的蔬菜大棚中分離得到的45株菌株以及中國農(nóng)業(yè)微生物菌庫中保存的19株菌株中,利用點(diǎn)

2、接法篩選到14株對茄科勞爾氏菌有拮抗作用的菌株,然后通過牛津杯法復(fù)篩得到6株抑菌效果較好的菌株。通過溫室盆栽試驗表明拮抗菌X10的防治效果最好,液體菌劑防治效果達(dá)到了81.8%,固體菌劑防治效果達(dá)到了65.4%。 2.對番茄青枯病拮抗菌X10進(jìn)行了形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征測定,結(jié)果表明它與側(cè)孢短芽孢桿菌種的特征一致。測定了菌株的16SrDNA序列并根據(jù)其構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育樹,在系統(tǒng)發(fā)育樹中,X10與側(cè)孢短芽孢桿菌形成一個類群,序列同

3、源性為99%。因此將X10鑒定為側(cè)孢短芽孢桿菌(Brevibacilluslaterosporus)。 3.從側(cè)孢短芽孢桿菌X10發(fā)酵液中提取的拮抗蛋白粗提液具有抑制茄科勞爾氏菌生長的效果,該抗菌蛋白粗提液具有良好的熱穩(wěn)定性,能耐90℃的高溫;用蛋白酶處理,其抑菌活性受胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K的影響;對氯仿敏感;隨著紫外照射時間的延長,活性受到影響;拮抗物質(zhì)25℃保存,活性28d內(nèi)基本不變;作用活性pH(pH5.0~11.0

4、)范圍較寬,這對于芽孢桿菌用于生物肥料的生產(chǎn)和保藏具有一定的理論指導(dǎo)作用。 4.根據(jù)溫室盆栽試驗的結(jié)果,制備側(cè)孢短芽孢桿菌X10的固體菌劑,在山東萊陽趙旺莊鄉(xiāng)露地蔬菜栽培區(qū)和山東肥城科技示范園的蔬菜大棚里進(jìn)行了小區(qū)試驗,對田間應(yīng)用效果進(jìn)行了測定。結(jié)果表明固體菌劑的兩種接種量對番茄青枯病的防治效果分別達(dá)到了58.42%和68.68%,固體菌劑蔬菜大棚施用能夠促進(jìn)番茄植株生長和增加產(chǎn)量。 5.提取了側(cè)孢短芽孢桿菌X10的基因

5、組DNA,以綠色熒光蛋白(GFP)為報告基因,以啟動子探針pUC19-GFP為載體,通過鳥槍法在大腸桿菌DH5a中構(gòu)建了X10的啟動子文庫。通過篩選獲得了14個陽性克隆,編號為P1~P14。對P2、P3、P6、P9、P10、P13和P14克隆中的重組質(zhì)粒的插入片段進(jìn)行了測序和在線啟動子預(yù)測。結(jié)果顯示插入片段Ps3和Ps6具有典型的原核啟動子的特征,其它五個插入片段則沒有典型的原核啟動子特征。將Ps6插入到穿梭載體pNW33N的多克隆位點(diǎn)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論