香菇種質(zhì)資源的鑒別及保藏方法的研究.pdf

1、目前香菇菌種市場比較混亂，菌種管理比較滯后，亂引種、亂命名比較普遍，導(dǎo)致同名異物或同物異名現(xiàn)象比較嚴(yán)重，不利于香菇品種間遺傳多樣性的客觀揭示。香菇菌種鑒定的研究，對菌種資源保護(hù)，防止菌種退化具有十分重要的意義。本文在參考國內(nèi)外相關(guān)資料基礎(chǔ)上，結(jié)合DNA分子標(biāo)記和拮抗實驗進(jìn)行了這方面研究。 本文采用ITS-PCR擴(kuò)增對提取得136個香菇栽培種進(jìn)行DNA提取的驗證，成功篩選了8對SCAR引物，在SCAR引物驗證中，均表現(xiàn)出多態(tài)性譜帶

2、。通過8個SCAR分子標(biāo)記把136個栽培香菇種進(jìn)行了親緣關(guān)系和聚類分析，結(jié)果分成了49類，其中復(fù)合類20類，單個類29類。拮抗實驗是在分子聚類的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，分為三種情況進(jìn)行，它們是：分子聚類為同一復(fù)合類之間進(jìn)行拮抗，分子聚類為不同種類間進(jìn)行拮抗，分子聚類親緣關(guān)系比較遠(yuǎn)的種類間進(jìn)行拮抗。結(jié)果是各個種類間均存在拮抗和無拮抗現(xiàn)象，通過實驗說明，分子標(biāo)記和拮抗兩種分類方法既有聯(lián)系又有區(qū)別，還可以自成體系。 新的菌株由于生理生態(tài)失控等因

3、素，致使菌種退化或老化，直接影響品質(zhì)，造成栽培失敗。因此常因菌種問題引起糾紛，甚至打官司。為了便于減少菌種退化與老化，香菇菌種保藏實驗研究顯得格外重要。本論文設(shè)計了六個單因素進(jìn)行保藏實驗，依次是：不同保藏方法、不同保藏介質(zhì)、不同程序降溫、不同菌齡、不同解凍溫度、不同防凍劑的研究。結(jié)果篩出最佳保藏方案為選取木屑培養(yǎng)基以香菇幼齡保藏，防凍劑為10％甘油，使用程序降溫儀降溫(從4℃到-40℃降溫速度以1℃/min最好)保藏到液氮中，保藏后取出