小鼠胚胎凍前和凍后分割效果的比較研究.pdf

1、本文主要就不同分割液、培養(yǎng)液、分割處理方法及不同的冷凍保護(hù)液和的冷凍處理方法對小鼠桑椹胚和囊胚的影響進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果如下： 1 首先研究了不同的分割液和不同胚胎發(fā)育階段對分割效果的影響，發(fā)現(xiàn)在12.5％蔗糖分割液中分割桑椹胚時(shí)，分割成功率顯著高于m-PBS處理組(60.83％vs 51.67％，P<0.05)，而分割囊胚時(shí)兩分割液之間無顯著性差異(P>0.05)；在m．PBS中分割囊胚和桑椹胚，其成功率前者顯著高于后者(7

2、0.37％vs 51.67％，P<0.01)，但是在12.5％蔗糖分割液中分別對囊胚和桑椹胚進(jìn)行分割時(shí)，兩者無顯著性差異(P>0.05)。 2 無論是桑椹胚還是囊胚，其半胚經(jīng)不同培養(yǎng)液m-PBS和TCM-199-Hepes培養(yǎng)后存活率差異均不顯著(62.50％vs 63.64％；80.36％vs 82.76％，P>0.05)；桑椹胚和囊胚分割后的半胚經(jīng)m-PBS培養(yǎng)液培養(yǎng)后，所得半胚存活率兩者間差異顯著(62.50％vs 80.

3、36％，P<0.05)，經(jīng)TCM-199-Hepes培養(yǎng)液培養(yǎng)后，所得半胚存活率兩者間差異顯著(63.64％vs 82.76％，P<0.05)。 3 桑椹胚去致密化后，其分割成功率顯著高于未處理組(73.08％vs 51.92％，P<0.01)，半胚培養(yǎng)后的囊胚發(fā)育率也顯著高于未處理組(71.15％vs 46.15％，P<0.0)。 4 半胚經(jīng)瓊脂包埋后，利用VSⅠ和VSⅡ冷凍液進(jìn)行OPS法玻璃化冷凍，解凍后其存活率均顯

4、著高于未處理組(90.16％ vs48.28％；88.52％Vs 44.83％，P<0.01)，培養(yǎng)48h后的半胚發(fā)育率，處理組也均顯著高于未處理組(61.82％vs 25.86％：61.11％vs 24.13％，P<0.01)。瓊脂包埋組解凍后的半胚存活數(shù)和發(fā)育率，VSⅠ和VSⅡ之間差異均不顯著(90.16％VS 88.52％；61.82％vs61.11％，P>0.051；未包埋組解凍后VSⅠ和VSⅡ之間差異也均不顯著(48.28％v

5、s 44.83％；25.86％vs 24.13％，P>0.05)。 5 桑椹胚和囊胚分別經(jīng)兩種不同保護(hù)液(VSⅠ和VSⅡ)冷凍后形態(tài)良好率差異均不顯著(96.94％vs 95.96％；86.87％VS 84.38％，P>0.05)；經(jīng)VSⅠ保護(hù)液冷凍后，桑椹胚和囊胚之間形態(tài)良好率差異非常顯著(96.94％vs86.87％，P<0.01)，經(jīng)VSⅡ保護(hù)液冷凍后，兩者之間形態(tài)良好率差異也極顯著(95.96％vs 84.38％，P<0.01)