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1、牛的胚胎移植技術(shù)主要包括超數(shù)排卵、胚胎回收鑒定、冷凍保存、受體的同期發(fā)情和胚胎的移植等過(guò)程。胚胎移植妊娠率低是制約胚胎移植工作的主要瓶頸。本文從生產(chǎn)應(yīng)用出發(fā),通過(guò)將3級(jí)雌性胚胎及用雄性胚胎制作的胚胎塊和胚胎滋養(yǎng)層分別與可用胚胎共移植,研究對(duì)牛胚胎移植妊娠率的影響,旨在探索出一種能夠提高牛胚胎移植妊娠率的有效途徑。
性別鑒定冷凍胚胎在35℃,30℃,25℃溫水中解凍,在CO2培養(yǎng)箱中用Holding培養(yǎng)5h的囊胚發(fā)育率分別為
2、52.50%,45.00%,57.50%,三組之間囊胚發(fā)育率無(wú)顯著差異(p>0.05)。解凍后的性別鑒定雄性胚胎分別采用不同系統(tǒng)培養(yǎng),CO2培養(yǎng)箱-Holding組囊胚率為58.8%,顯著高于恒溫試管架-Holding組38.0%(p<0.05);CO2培養(yǎng)箱-CR1組囊胚率為68.4%,高于恒溫試管架-CR1組42.9%(p>0.05)。性別鑒定凍胚用恒溫試管架-Holding培養(yǎng)7-18h囊胚發(fā)育率為31.25%-47.22%,10
3、h囊胚發(fā)育率最高47.22%;在恒溫試管架-CR1中培養(yǎng)2-7h囊胚發(fā)育率為9.52%-38.09%,4h囊胚發(fā)育率最高47.62%.
一個(gè)3級(jí)胚胎和一個(gè)3級(jí)胚胎(3+3級(jí)胚胎)共移植妊娠率為11.76%,極顯著低于一個(gè)1級(jí)胚胎和一個(gè)3級(jí)胚胎(1+3級(jí)胚胎)共移植妊娠率63.64%(p<0.01),也顯著低于一個(gè)2級(jí)胚胎和一個(gè)3級(jí)胚胎(2+3級(jí)胚胎)共移植妊娠率50.00%(p<0.01);1+3級(jí)胚胎移植妊娠率高出1級(jí)胚
4、胎移植妊娠率11.64個(gè)百分點(diǎn)(63.64% vs 52.00%)(p>0.05),2+3級(jí)胚胎移植妊娠率高出2級(jí)胚胎妊娠率8.62個(gè)百分點(diǎn)(50.00% vs 41.38%)(p>0.05)。性別鑒定胚胎和一個(gè)3級(jí)胚胎共移植妊娠率高出對(duì)照組移植妊娠率19.30個(gè)百分點(diǎn)(66.67% vs.47.37%);性控胚胎和一個(gè)3級(jí)胚胎共移植妊娠率高出性控胚胎移植妊娠率6.43個(gè)百分點(diǎn)(52.38% vs.45.95%),但均無(wú)顯著差異(p>0
5、.05);性別鑒定胚胎和性控胚胎移植妊娠率無(wú)顯著差異(47.37% vs.45.95%)(p>0.05)。
胚胎滋養(yǎng)層與常規(guī)胚胎共移植妊娠率為80.00%,高于對(duì)照組妊娠率60.42%(p>0.05);胚胎滋養(yǎng)層、胚胎塊與性別鑒定凍胚共移植妊娠率分別為51.16%、62.50%,均高于對(duì)照組妊娠率43.82%(p>0.05);鮮胚滋養(yǎng)層、胚胎塊與性鑒鮮胚共移植妊娠率分別為55.56%、68.75%,高于對(duì)照妊娠率46.15
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