松毛蟲對(duì)環(huán)境適應(yīng)性的基因分析.pdf

1、本文運(yùn)用AFLP分子標(biāo)記的方法,對(duì)不同溫度、濕度下的3種松毛蟲種群和2種林分類型下的油松毛蟲種群進(jìn)行了遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的研究，并找到3種松毛蟲與溫度、濕度相關(guān)的特異性條帶，以及松毛蟲與不同林分類型相關(guān)的特異性條帶,并進(jìn)行克隆、測(cè)序和序列分析。研究結(jié)果如下：
　　 ①本試驗(yàn)以油松毛蟲為材料，建立了適合松毛蟲基因組DNA研究的AFLP體系。用優(yōu)化的AFLP反應(yīng)體系，以油松毛蟲、赤松毛蟲和馬尾松毛蟲為材料篩選引物，從81對(duì)引物組合

2、中篩選出10對(duì)多態(tài)性高，重復(fù)性好的引物組合。
　　 ②油松毛蟲、赤松毛蟲和馬尾松毛蟲中存在于種群內(nèi)的基因多樣度HS為0.0895，不同種群間遺傳分化系數(shù)GST為0.7623，即種群間的遺傳變異占種群總的遺傳多樣性的76.23％，小部分變異存在于種群內(nèi)（23.77％）。不同松毛蟲種群之間的基因流Nm為0.1559，說明種群之間基因交流不強(qiáng)烈，無法有效抵消遺傳漂變所引起的種群分化。聚類結(jié)果表明，油松毛蟲與馬尾松毛蟲相聚為一類，在與赤

3、松毛蟲聚在一起。
　　 不同林分類型中油松毛蟲種群的總基因多樣度HT為0.3550，其中存在于種群內(nèi)的基因多樣度HS為0.2722，不同種群間遺傳分化系數(shù)GST為0.2332，即種群間的遺傳變異占種群總的遺傳多樣性的23.32％，大部分變異存在于種群內(nèi)（76.68％）,說明油松毛蟲具有豐富的遺傳多樣性，種群之間基因交流強(qiáng)烈，種群間的分化程度較低。
　　 ③分別構(gòu)建了油松毛蟲、赤松毛蟲、馬尾松毛蟲和混交林中油松毛蟲的基因組

4、DNA混合池，采用81對(duì)Pst I/Taq I引物組合，對(duì)4個(gè)基因池進(jìn)行AFLP擴(kuò)增，獲得了松毛蟲與環(huán)境有關(guān)的2個(gè)分子標(biāo)記MW和SC。在引物P1-T4中，觀察到了1條馬尾松毛蟲所特有的多態(tài)性DNA片段，標(biāo)記為MW，56bp；在P7-T9引物組合中，又觀察到了1條赤松毛蟲所特有的多態(tài)性DNA片段，標(biāo)記為SC，124bp。對(duì)以上2個(gè)標(biāo)記進(jìn)行了驗(yàn)證，結(jié)果證明這2個(gè)標(biāo)記的準(zhǔn)確率達(dá)100％。將2個(gè)特異性DNA片段克隆到T-Easy載體上，進(jìn)行測(cè)序