調(diào)控幾個(gè)脂肪酸合成關(guān)鍵基因?qū)τ筒朔N子芥酸含量的影響.pdf

1、油菜中的芥酸（erueic acid，C22：1）屬于超長(zhǎng)鏈脂肪酸（VLCFA），是一種重要化工原料，目前的主要提取來(lái)源是高芥酸油菜籽。編碼延長(zhǎng)酶的fae1基因是油菜芥酸合成途徑上的關(guān)鍵基因。作為芥酸合成的底物，油酸的含量也與芥酸的含量密切相關(guān)，所以通過(guò)調(diào)控去飽和酶基因來(lái)控制油酸的積累量，也可間接的控制芥酸含量；編碼去飽和酶的基因主要有2個(gè)，fad2及fad3。通過(guò)基因工程手段對(duì)這3個(gè)基因進(jìn)行調(diào)控有可能較大幅度增加芥酸含量。
　　

2、 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)從高芥酸含量的甘藍(lán)型油菜中獲得fae1、fad2、fad3基因及種子特異啟動(dòng)子napin全長(zhǎng)的編碼序列，以pB1121為載體，NPTⅡ?yàn)檫x擇標(biāo)記基因，構(gòu)建在種子中特異表達(dá)的fae1超表達(dá)建構(gòu)、fad2及fad3反義和干涉建構(gòu)，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化導(dǎo)入擬南芥和油菜，以期獲得芥酸含量提高的轉(zhuǎn)基因植株。
　　 目前獲得的擬南芥陽(yáng)性轉(zhuǎn)化植株已繁殖到T2代，經(jīng)氣相色譜法對(duì)脂肪酸組成進(jìn)行分析，得出以下結(jié)論：
　　

3、（1）在fad2反義建構(gòu)的轉(zhuǎn)基因株系中，油酸，亞油酸，亞麻酸三種脂肪酸含量的平均值分別為13.93％，32.97％，19.69％（野生型的平均值分別為：9.70％，33.44％，24.09％）；在fad2干涉建構(gòu)的轉(zhuǎn)基因株系中，上述三種脂肪酸含量的平均值分別為13.94％，31.07％，19.61％。與野生型相比，兩種建構(gòu)對(duì)轉(zhuǎn)基因植株均產(chǎn)生了油酸含量上升，亞油酸和亞麻酸含量下降的效果。
　　 （2）在fad3反義建構(gòu)的轉(zhuǎn)基因株系

4、中，油酸，亞油酸，亞麻酸三種脂肪酸含量的平均值分別為13.58％，35.25％，17.59％（野生型的平均值分別為：9.70％，33.44％，24.09％）；在fad3干涉建構(gòu)的轉(zhuǎn)基因株系中，上述三種脂肪酸含量的平均值分別為12.04％，33.48％，18.13％，與野生型相比，兩種建構(gòu)對(duì)轉(zhuǎn)基因植株均產(chǎn)生了油酸含量上升，亞麻酸含量下降的效果。
　　 在油菜中進(jìn)行了fae1超表達(dá)和fad2反義建構(gòu)的遺傳轉(zhuǎn)化，目前fae1超表達(dá)建構(gòu)