廣藿香多倍體誘導(dǎo)與鑒定研究.pdf

1、廣藿香［Pogostemon cablin(Blanco) Benth.］為唇形科刺蕊草屬植物，以干燥地上部分入藥，其性辛、微溫，是常用傳統(tǒng)藥材。近年來，由于城市發(fā)展破壞了廣藿香的道地產(chǎn)區(qū)，多年來的無性繁殖也導(dǎo)致了廣藿香缺少基因多樣性，加之種植過程中病蟲害發(fā)生率高、連作重茬嚴(yán)重、種質(zhì)退化等問題。藥用品種石牌廣藿香和高要廣藿香已經(jīng)瀕臨滅絕，而原本主要用于提取揮發(fā)油的海南廣藿香成為了主要栽培品種。因此培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、遺傳性狀穩(wěn)定的新品種是當(dāng)

2、務(wù)之急。植物多倍體具有生物量高、抗逆性強(qiáng)、藥用活性成分含量增多等優(yōu)點(diǎn)，為藥用植物的開發(fā)與利用提供了一條新的途徑。本研究圍繞廣藿香多倍體株系的選育，在確定了三個(gè)品種廣藿香染色體數(shù)目的基礎(chǔ)上，以道地品種石牌廣藿香作為育種起始材料，利用秋水仙素成功誘導(dǎo)、鑒定了5個(gè)處理，共13個(gè)同源八倍體株系，并進(jìn)行了品質(zhì)評(píng)價(jià)分析。主要結(jié)果如下：
　?。?）廣藿香多倍體誘導(dǎo)
　　利用秋水仙素處理廣藿香快繁組織，分別探討了不同處理方法（莖尖覆蓋法、浸

3、泡法和混培法）、不同誘導(dǎo)材料（愈傷組織、叢生芽、再生苗）、不同秋水仙素誘導(dǎo)濃度（0.025％～0.2%）、不同誘導(dǎo)時(shí)間（0～96h）對(duì)廣藿香誘變率的影響。實(shí)驗(yàn)證明0.05%秋水仙素浸泡叢生芽72h效果較好，氣孔鑒定誘導(dǎo)率達(dá)85%（占處理苗）。通過變異苗染色體數(shù)觀察，為2n=8x=128，確定得到廣藿香八倍體。同時(shí)也得到了一些嵌合體、畸形植株。秋水仙素浸泡叢生芽是獲得廣藿香同源八倍體的有效方法。
　　（2）廣藿香多倍體鑒定
　

4、　本研究先后優(yōu)化了廣藿香根尖染色體制片與葉片流式細(xì)胞術(shù)的實(shí)驗(yàn)條件，結(jié)合形態(tài)特征變化，建立了切實(shí)可行的廣藿香倍性鑒定流程。經(jīng)過篩選，最終獲得13個(gè)廣藿香多倍體株系。氣孔大小、氣孔密度、葉型指數(shù)是鑒定廣藿香倍性較為簡(jiǎn)單有效的方法；酶解去壁低滲法處理能夠獲得分離度高、可用于廣藿香計(jì)數(shù)的染色體；流式細(xì)胞術(shù)能夠精確、高效的鑒定同質(zhì)多倍體。
　?。?）廣藿香多倍體品質(zhì)評(píng)價(jià)
　　在形態(tài)學(xué)上與普通植株存在較大差異，表現(xiàn)為莖粗壯，葉片大而厚，