一株新的海洋細(xì)菌及其靈菌紅素產(chǎn)生條件和生物活性的研究.pdf

1、該文研究了一株新的產(chǎn)靈菌紅素(prodigiosin,PG)的海洋細(xì)菌--紅色海桿菌(Rhodomarinobacter sp.)的生物學(xué)特性及其次級(jí)代謝產(chǎn)物一些性質(zhì).描述了該菌的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特征,優(yōu)化了該菌產(chǎn)生PG的發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,并對(duì)其產(chǎn)生的PG進(jìn)行了分離純化,最后對(duì)PG的物化特性和抗菌性及對(duì)幾種癌細(xì)胞凋亡作用進(jìn)行了一系列的研究.結(jié)果表明,該紅色海桿菌生長(zhǎng)需要Na<'+>,光照對(duì)菌體的生長(zhǎng)和PG的產(chǎn)量有影響.該

2、菌生長(zhǎng)的溫度范圍為20℃~38℃,在20℃~23℃時(shí)菌體可產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì),35℃~38℃時(shí)菌體為白色,產(chǎn)生靈菌紅素最適生長(zhǎng)溫度為27℃.對(duì)該菌株產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響進(jìn)行了研究.用MTT法測(cè)得PG對(duì)人胃腺癌細(xì)胞MCG803的IC<,50>為0.62μ g/mi,對(duì)人肝癌細(xì)胞BEL7402的IC<,50>為0.45 μg/m1.5 μg/ml的PG處理MCG803細(xì)胞24h,用Hoechest33258染色,觀察到典型的凋亡

3、核形態(tài);通過(guò)單細(xì)胞凝膠電泳(彗星電泳),觀察到MCG803凋亡細(xì)胞基因組的降解.用2.5及5 μ g/ml的PG處理MCG803細(xì)胞24h,經(jīng)流式細(xì)胞儀分析,凋亡細(xì)胞比率由未經(jīng)化合物處理時(shí)的4.2％上升到14.5%和20.6%.鑒于2.5 μ g/mlPG處理MCG803僅24h,絕大部分細(xì)胞已溶脹破裂死亡,故初步判斷PG對(duì)MCG803的細(xì)胞毒性作用,誘導(dǎo)凋亡不是其主要的方式.PG的作用還能導(dǎo)致MCG803周期細(xì)胞比例的改變.從該菌株代

4、謝物分離得到的藍(lán)色物質(zhì)對(duì)MCG803的IC<,50>為4.6 μ g/mi,對(duì)BEL7402的IC<,50>為6.8 μ g/mi.10 μg/mi的藍(lán)色物質(zhì)處理的MCG803細(xì)胞,24h后即可觀察到典型的凋亡核形態(tài)及基因組的降解.用5,10,20 μ g/mi的藍(lán)色物質(zhì)處理MCG803細(xì)胞24h,其凋亡細(xì)胞比例由未經(jīng)處理的4.2%上升到10.1%,63.4%,70.7%.因此初步判斷,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡(apoptosis)是其發(fā)揮細(xì)胞