一株粘質(zhì)沙雷氏菌的篩選及其所產(chǎn)紅色素抗癌功能初步研究.pdf

1、靈菌紅素(Prodigiosin)是由粘質(zhì)沙雷氏菌產(chǎn)生的一類紅色次級代謝產(chǎn)物，其分子中含有三個共軛的吡咯環(huán)。隨著對靈菌紅素研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)靈菌紅素具有抗癌、抗菌、抗瘧疾、免疫抑制和抑藻的功效。靈菌紅素的抗癌性優(yōu)勢主要體現(xiàn)在對癌細胞的較強天的針對性上，作為一種新型抗癌藥物的前體物質(zhì)，粘質(zhì)沙雷氏菌和靈菌紅素的研究引起了國內(nèi)外學(xué)者廣泛的關(guān)注。
　　本文主要完成鱖魚腸道中一株粘質(zhì)沙雷氏菌株的篩選和鑒定，并將其命名為S.marcesce

2、ns HFUT1301。色素的分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定;培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件的優(yōu)化，以提高色素的產(chǎn)量;通過MTT法測定靈菌紅素對肺癌細胞A-549、乳腺癌細胞MCF-7的生長抑制性，考察靈菌紅素對兩種常見的癌細胞的抑制作用。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　(1)通過單菌落觀察、菌株的生理生化鑒定和16S rDNA序列分析，與NCBI數(shù)據(jù)庫比對和鑒定，確定試驗所得菌株為一株新型粘質(zhì)沙雷氏菌，并將其命名為Smarcescens HFUT13

3、01。
　　(2)色素的結(jié)構(gòu)分析:通過UV-Vis全波長掃描、LC-MS、FT-IR和NMR圖譜的對色素進行結(jié)構(gòu)分析和鑒定，確定該色素為靈菌紅素色素，分子式為C20H25N3O（對應(yīng)的分子量為323），并推測了紅色素的結(jié)構(gòu)式。
　　(3)為了進一步提高S.marcescens HFUT1301發(fā)酵產(chǎn)靈菌紅素的產(chǎn)量，對培養(yǎng)基組分和發(fā)酵條件進行優(yōu)化，結(jié)果表明:當(dāng)一級大豆油、蛋白胨、NaCl和K2HPO4的添加量分別為4％(v/w

4、)、1.5％(w/w)、0.15％(w/w)和0.15％(w/w);發(fā)酵條件為:溫度為30℃、接種量為1％(v/v)、裝液量為70mL/250mL三角瓶、振蕩培養(yǎng)轉(zhuǎn)速為200r/min，在粘質(zhì)沙雷氏菌進行發(fā)酵36h后，靈菌紅素的產(chǎn)量最大為2.98g/L。此時對應(yīng)粘質(zhì)沙雷氏菌的胞外脂肪酶最高活性為20U/mL。
　　(4)采用MTT法測定不同濃度的靈菌紅素，對人肺癌細胞A-549和人乳腺癌細胞MCF-7的生長抑制作用。在最大血藥濃度