應(yīng)激影響肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的機(jī)制研究.pdf

1、為探討應(yīng)激對肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的影響及內(nèi)在機(jī)制，本研究以外源？？糖皮質(zhì)激素的方法建立應(yīng)激反應(yīng)模型，采用在體和離體試驗(yàn)相結(jié)合的方式，較為系統(tǒng)地研究了糖皮質(zhì)激素、胰島素和NO三者對肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的獨(dú)立影響及其組合效應(yīng)。 在第二章中，第一節(jié)研究應(yīng)激對肉雞機(jī)體基礎(chǔ)糖代謝的影響，共分長期應(yīng)激和急性應(yīng)激兩個試驗(yàn)。第二節(jié)研究離體CORI’處理對肉雞骨骼肌糖攝取能力的影響，選取21日齡雄性AA肉雞36只，剝離左右小腿后側(cè)的腓骨長肌，然后

2、體外孵育。將來自同一只雞的兩條肌肉樣本組成應(yīng)激和對照兩個配對組，應(yīng)激組內(nèi)的肌肉樣本進(jìn)行如下6種處理：cORT、CORT+SNP、 CORT+L-NAME、 CORT+INS、 CORT+INS+SNP 和CORT+INS+L-NAME處理，對照組內(nèi)的肌肉樣本也進(jìn)行6種處理：空白、SNP、L-NAME、INS、INS+SNP和INS+L-NAME處理，每個處理都有6條肌肉樣本。孵育結(jié)束后，測定肌肉樣本的NO水平、NOS的活力和肌糖原含量；

3、同時利用同位素雙標(biāo)法測定在NO供體SNP、NOS抑制劑L-NAME和糖皮質(zhì)激素CORT存在條件下，基礎(chǔ)狀態(tài)或INS誘導(dǎo)的肉雞離體骨骼肌的2-DG轉(zhuǎn)運(yùn)速率。第三節(jié)研究活體CORT處理對肉雞骨骼肌糖攝取能力的影響，試驗(yàn)設(shè)計與第二節(jié)類似，唯一不同點(diǎn)是將CORT的處理方式由體外孵育液添加改為活體皮下注射。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SNP引起肌肉基礎(chǔ)狀態(tài)和INS誘導(dǎo)的2-DG轉(zhuǎn)運(yùn)速率增加，表明NO是調(diào)節(jié)骨骼肌糖代謝的一個重要因子。CORT引起肌肉基礎(chǔ)狀態(tài)下2-D

4、G轉(zhuǎn)運(yùn)速率增加，提示其可能是應(yīng)激狀態(tài)下機(jī)體糖原合成增加的重要原因，但這并不能說明其促進(jìn)了GLU的有效利用。CORT抑制INS誘導(dǎo)的肌肉對2-DG的轉(zhuǎn)運(yùn)速率，加入SNP后，骨骼肌的糖攝取能力明顯改善，表明應(yīng)激早期，機(jī)體NO濃度的下降，可能與糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的IR有一定關(guān)系。與前人所做的活體L-NAME處理不同的是，沒有觀察到離體L-NAME處理對骨骼肌2-DG轉(zhuǎn)運(yùn)速率的影響，表明血液動力學(xué)因素在骨骼肌糖攝取機(jī)制中同樣起著非常關(guān)鍵的作用。

5、 第三章研究內(nèi)容將GLU與ARG負(fù)荷試驗(yàn)結(jié)合起來，共分三個試驗(yàn)，分別研究肉雞在正常生理狀態(tài)、急性應(yīng)激狀態(tài)和高INS狀態(tài)下的糖代謝狀況。試驗(yàn)一、二、三分別選取40、41、42日齡Arbor Acres肉用公雞24只，分為GLU、GLU+L-ARG、L-ARG和對照四組，所有雞單籠飼養(yǎng)，首先禁食，6小時后，所有雞空腹采血，然后試驗(yàn)-肉雞按0.4ml/kgBW的劑量皮下注射玉米油和生理鹽水，試驗(yàn)二肉雞按0.4ml/kgBW的劑量皮下注射C

6、ORT(溶于玉米油，10mg/ml)和生理鹽水，試驗(yàn)三肉雞按0.4ml/kgBw的劑量皮下注射INS(溶于生理鹽水，2.5IU/ml)和玉米油。注射完畢后，GLU組肉雞按5ml/kgBW灌服GLU溶液(0.4g/ml)，GLU+L-ARG組肉雞按5ml/kgBW灌服GLU和ARG混合溶液(GLU濃度0.4g/ml，ARG濃度0.1g/ml)，L-ARG組肉雞按5ml/kgBW灌服ARG溶液(0.1g/ml)，對照組按5ml/kgBw灌服

7、蒸餾水。灌服完畢后，每只雞于30min、60min和120min采血，分離血漿，測定NO、NOS、UA、血糖、TG和INS含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，L-ARG能夠促進(jìn)機(jī)體NO的產(chǎn)生，在實(shí)際生產(chǎn)和臨床治療中可以作為一種NO的供體使用。應(yīng)激影響動物機(jī)體的蛋白質(zhì)、糖類和脂肪代謝，而L-ARG可以通過抑制應(yīng)激引起的機(jī)體NO水平降低，從而在一定程度上改善機(jī)體物質(zhì)代謝，降低應(yīng)激的不利影響。應(yīng)激時糖皮質(zhì)激素的大量釋放誘發(fā)IR現(xiàn)象，使用L-ARG處理后，機(jī)體的高