黃瓜硝酸鹽含量SRAP標(biāo)記分析.pdf

1、黃瓜(Cucumis sativus L.)是我國北方各省市場周年供應(yīng)中的主要蔬菜之一，但其較高硝酸鹽含量對人類的健康構(gòu)成了巨大的威脅。本研究利用高硝酸鹽含量和低硝酸鹽含量的黃瓜純合材料，采用BSA(Bulked Segregant Analysis)法結(jié)合SPAP(Sequence-related AmplifiedPolymorphism，SRAP，序列相關(guān)擴(kuò)增多態(tài)性)分子標(biāo)記技術(shù)并進(jìn)行克隆，尋找與黃瓜硝酸鹽含量相關(guān)的基因全長或部分

2、片段。研究結(jié)果對于選育低硝酸鹽含量品系，提高黃瓜的品質(zhì)具有重要意義，為今后黃瓜品質(zhì)育種提供了依據(jù)和材料，對于提高黃瓜的品質(zhì)具有重要意義。
　　 本研究主要結(jié)果包括：⑴對高硝酸鹽黃瓜品種1058(190.71mg/kg·FW)與低硝酸鹽品種D0327(136.22mg/kg·FW)以及其雜交衍生的150個(gè)F2代的硝酸鹽含量采用磺基水楊酸比色法進(jìn)行測定，其基本符合正態(tài)分布。⑵采用改良的CTAB(三甲基十六烷基溴化銨)法，提取黃瓜基因

3、組DNA。經(jīng)1％瓊脂糖凝膠電泳檢測，結(jié)果表明提取的基因組DNA帶型整齊，質(zhì)量好。⑶利用正交設(shè)計(jì)法，建立了穩(wěn)定高效的黃瓜SRAP-PCR反應(yīng)體系，提高了SRAP-PCR檢測效率。⑷采用BSA(集群分離分析法)構(gòu)建極端高/低硝酸鹽DNA池。用380對SRAP隨機(jī)引物基因池進(jìn)行擴(kuò)增，篩選到具有差異帶(高濃度硝酸鹽植株沒有而低濃度硝酸鹽植株有)的引物一對(ME8-EM1)。用上述引物對F2植株個(gè)體進(jìn)行擴(kuò)增，獲得了與低濃度硝酸鹽性狀連鎖的穩(wěn)定的差